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重組蛋白的相關介紹
閱讀：629 發(fā)布時間：2022-11-25
重組蛋白的產(chǎn)生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質(zhì)。在知道編碼該蛋白的基因序列之后，人工克隆該基因進入質(zhì)粒。然后再把質(zhì)粒轉染如大腸桿菌。這樣大腸桿菌就成了蛋白表達的工廠。表達出來的蛋白再進過分離純化，就是重組蛋白。
重組蛋白的產(chǎn)生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質(zhì)。體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng)：原核蛋白表達，哺乳動物細胞蛋白表達，酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。生產(chǎn)的蛋白在活性和應用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運用選擇合適的蛋白表達系統(tǒng)，提高表達成功率。
重組蛋白有三種較為廣泛使用的表達系統(tǒng)，即大腸桿菌表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)和CHO細胞表達系統(tǒng)。其中，大腸桿菌是表達重組蛋白較常用的宿主菌，已應用于許多具有重要藥用價值的蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。
大腸桿菌表達系統(tǒng)具有生長速度快、培養(yǎng)成本低、遺傳背景清晰、易于實現(xiàn)高密度培養(yǎng)等優(yōu)點。大腸桿菌DH5α是一種突變株，主要表現(xiàn)為對外來DNA缺乏免疫力。大腸桿菌DH5α是基因工程中常用的宿主菌之一。與正常菌株相比，它缺乏某種免疫機制。