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快速內(nèi)切酶XhoI
  • 快速內(nèi)切酶XhoI
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更新時(shí)間:2025-04-08 21:00:07

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快速內(nèi)切酶XhoI快速內(nèi)切酶經(jīng)過基因工程重組、能夠在5~15分鐘內(nèi)精確完成DNA切割的高保真限制性內(nèi)切酶,適用于質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物或基因組DNA等的快速酶切。快速內(nèi)切酶具有如下特點(diǎn):5~15分鐘內(nèi)即可完成酶切;共用一種酶切Buffer,大大簡(jiǎn)化酶切反應(yīng)體系;良好的酶活冗余度,輕松應(yīng)對(duì)底物過量或困難模板酶切。

快速內(nèi)切酶XhoI


產(chǎn)品貨號(hào)F5583S

儲(chǔ)存條件-20℃                                                    





同裂酶:PaeR7I,TliI,BssHI,Sfr274I,SlaI,StrI

注:同裂酶對(duì)于不同的甲基化修飾可能具有不同敏感性。

產(chǎn)品組成

組分

規(guī)格

LabFD XhoI

500ul

10×LabFD™ Buffer

3×1ml

10×LabFD™ Color Buffer

3×1ml

產(chǎn)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

LabFD™快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組、能夠在5~15 分鐘內(nèi)精確完成 DNA 切割的高保真限制性內(nèi)切酶,適用于質(zhì)粒 DNA、PCR 產(chǎn)物或基因組 DNA 等的快速酶切。LabFD™ 快速內(nèi)切酶具有如下特點(diǎn):5~15 分鐘內(nèi)即可完成酶切;共用一種酶切Buffer,大大簡(jiǎn)化酶切反應(yīng)體系;良好的酶活冗余度,輕松應(yīng)對(duì)底物過量或困難模板酶切。此外,LABLEAD去磷酸化、連接試劑在LabFD™酶切Buffer 中具有baifenzhibai活性,支持一管化反應(yīng),提升“酶切-修飾-連接"的體驗(yàn)。

建議的反應(yīng)條件

1× LabFD™緩沖液;

37℃溫育;

參照“DNA快速酶切流程"配制反應(yīng)體系。

失活條件

80℃溫育20min。

質(zhì)量控制

功能活性檢測(cè)

最shi反應(yīng)溫度下,在20ul反應(yīng)體系中,1ul LabFD XhoI能夠在15min 內(nèi)*消化1ug λDNA(HindIII digest)

超長時(shí)間溫育檢測(cè)

最shi反應(yīng)溫度下,將1ul LabFD XhoI 1ugλDNA(HindIII digest)共同溫育3h,未檢測(cè)到其他核酸酶污或星號(hào)活性引起的底物非特異性降解,延時(shí)酶切可能出現(xiàn)星號(hào)活性。

酶切-連接-再酶切檢測(cè)

最shi反應(yīng)溫度下,使用 1ul LabFD XhoI消化底物,回收酶切產(chǎn)物。在22℃下使用適量Fast T4 DNA Ligase可以將酶切產(chǎn)物重新連接將連接產(chǎn)物再次回收后,使用相同的內(nèi)切酶可以重新切開連接產(chǎn)物。

非特異性內(nèi)切酶活性檢測(cè)

最shi反應(yīng)溫度下,將1ul LabFD™ XhoI與1ug超螺旋質(zhì)粒DNA共同溫育4h,使用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),質(zhì)粒DNA仍然處于超螺旋狀態(tài)。

藍(lán)白斑檢測(cè)

將含有單一lacZα基因的載體以1ul LabFD™ XhoI消化,重新連接后轉(zhuǎn)化入大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞,涂布在含有對(duì)應(yīng)抗生素、IPTG 和X-gal的LB培養(yǎng)基平板上。連接正確的產(chǎn)物會(huì)生長出藍(lán)色菌落,而連接錯(cuò)誤(即DNA末端切口不完整)的產(chǎn)物將得到白色菌落。對(duì)于LabFD™系列限制酶而言,白色菌落比例應(yīng)小于1%。





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