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單克隆抗體糖型分析的常用方法

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單克隆抗體糖型分析的常用方法檢測技術服務詳情介紹

單克隆抗體(mAbs)由單一的B淋巴細胞克隆產生,它們與特定的抗原有高度特異性的結合。除了dànbáizhì結構,單克隆抗體的糖鏈也對其功能、生物分布、免疫原性和穩定性有重要影響。因此,對單克隆抗體的糖型進行分析是藥物開發中的一個關鍵步驟。


以下是常用的單克隆抗體糖型分析方法:


1.毛細管電泳-質譜聯用(CE-MS):

這種方法特別適合于分析N-糖型。毛細管電泳用于分離糖型,而質譜用于結構鑒定。


2.液相色譜-質譜聯用(LC-MS):

可以用于分析N-糖和O-糖。首先利用酶解或化學方法從抗體上釋放糖,然后使用液相色譜進行分離和質譜進行結構鑒定。


3.熒光標記和HPLC分析:

糖鏈首先被釋放并與熒光標簽反應,然后使用HPLC進行分離和定量。


4.糖凝集素結合測定(Lectin Blotting):

使用特定的糖凝集素與特定糖結構結合,可以用于鑒定特定的糖型結構。


5.NMR(核磁共振):

可以提供關于糖結構的詳細信息,但需要較大的樣品量,并且技術要求較高。


6.酶聯免疫吸附試驗 (ELISA):

使用特定的糖型結合蛋白或抗體來檢測和定量糖鏈。


每種技術都有其優勢和限制。選擇哪種方法通常取決于分析的目的、樣品的可用量、所需的靈敏度和分辨率以及可用的儀器設備。在藥物開發的不同階段,可能需要使用多種技術來全面評估產品的糖型異質性和一致性。

百泰派克不同生物內產生的不同類型的N-聚糖

圖1

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