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sec蛋白純化,即尺寸排阻色譜(Size Exclusion Chromatography, SEC),是一種基于分子尺寸差異的分離技術。它主要用于dànbáizhì、核酸及其他生物大分子的分離和純化。sec蛋白純化的核心原理是利用多孔基質填充柱,通過分子在凝膠顆粒之間的流動路徑不同實現分離。大分子因無法進入小孔而快速通過,小分子則會進入孔隙中滯留較長時間,從而根據分子大小依次流出。這項技術在生物化學、分子生物學研究中具有廣泛應用,尤其在dànbáizhì的結構分析、復合物研究、聚合狀態分析等領域中。sec蛋白純化不僅用于實驗室研究,還在生物制藥工業中有所貢獻。它能夠幫助研究人員快速有效地分離天然dànbáizhì、重組dànbáizhì及其復合物,以確保下游實驗的準確性和成功率。此外,sec蛋白純化過程通常不會改變dànbáizhì的天然構象和生物活性,這對于需要保持功能活性的dànbáizhì研究尤為關鍵。在藥物開發過程中,該技術用于檢測藥物制劑中dànbáizhì的聚合狀態,以保證藥物的安全性和有效性。由于sec蛋白純化能夠在溫和條件下進行,無需化學修飾和高鹽濃度,因此對樣品的損傷較小,是一種非破壞性技術。其應用不jǐnxiàn于dànbáizhì,還適用于多糖、核酸、納米顆粒等其他生物大分子的分離和分析。
一、sec蛋白純化的優缺點
1.優點
(1)可以在溫和的條件下進行,保持dànbáizhì的天然構象和活性。
(2)不需要化學修飾或標記,適用于生物活性物質的分離。
(3)能夠同時提供有關分子量和純度的信息。
2.缺點
(1)分離能力有限,主要適用于分子量差異較大的樣品。
(2)分辨率相對較低,難以分離結構和分子量非常相似的分子。
(3)需要較長的分離時間,樣品處理量有限。
二、實驗注意事項
在進行sec蛋白純化實驗時,需要注意以下幾點以確保實驗的成功:
1.樣品體積與濃度
樣品體積過大會影響分辨率,因此需根據色譜柱的容量選擇合適的樣品體積。樣品濃度過高可能導致柱子過載,應保持在推薦范圍內。
2.緩沖液的選擇
緩沖液的pH和離子強度會影響dànbáizhì的溶解性和穩定性,應根據dànbáizhì的性質選擇合適的緩沖液。
3.柱子的維護
定期清洗和維護色譜柱以延長其使用壽命,并確保分離效果的一致性。
百泰派克生物科技在sec蛋白純化方面具備豐富的經驗與zhuānyè技術,我們的團隊能夠為客戶提供定制化的dànbáizhì純度分析方案,確保高質量的分離效果。我們致力于為客戶提供zuì優質的服務,如有需要,歡迎與我們合作,無論是學術研究還是工業應用,我們都能為您提供全面的支持和解決方案。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白zhìzǔxué分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
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5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術優良,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
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②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
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