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2Ddànbáizhì組學是用于分離和鑒定復雜生物樣本中dànbáizhì的分析技術。此技術的全稱是二維凝膠電泳(Two-Dimensional Gel Electrophoresis),通常簡稱為2-DE。2Ddànbáizhì組學結合了兩種分離方法:等電聚焦和SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳),以此來有效分離和分析dànbáizhì分子。這種方法的核心價值在于其能夠在單一實驗條件下分離數(shù)千種dànbáizhì,使研究人員能夠全面分析細胞或組織的dànbáizhì表達譜。2Ddànbáizhì組學的應用范圍十分廣泛。在生物醫(yī)學研究中,它被用于識別與疾病相關的生物標志物,通過對比健康與病變組織的dànbáizhì表達差異,研究人員可以識別出潛在的疾病標志物幫助理解疾病的分子機制以及開發(fā)新的診斷工具。在農業(yè)科學中,它可以用于研究植物對環(huán)境壓力的反應,以及改良作物的dànbáizhì含量。此外,在基礎生物學研究中,該技術有助于揭示dànbáizhì的翻譯后修飾、相互作用和功能。在制藥工業(yè)中,這項技術用于藥物開發(fā)過程中,以確保藥物的有效性和安全性。通過與質譜技術結合,2Ddànbáizhì組學在dànbáizhì鑒定和定量分析方面的能力進一步增強,極大地推動了dànbáizhì組學領域的發(fā)展。
一、2Ddànbáizhì組學的技術流程
1.樣本制備
樣本通常來源于組織、細胞或體液,經(jīng)過復雜的裂解和沉淀步驟,以確保dànbáizhì能夠以zuìjiā狀態(tài)進入后續(xù)的分離過程。樣本制備的質量直接影響到2D凝膠的分辨率和后續(xù)分析的準確性。
2.分離步驟
2Ddànbáizhì組學的分離過程分為兩個主要步驟。dìyī步是等電聚焦(IEF),通過在pH梯度中分離dànbáizhì,使其在等電點處聚焦。第二步是SDS-PAGE,它使dànbáizhì根據(jù)分子量進行分離。通過這兩個步驟,dànbáizhì在二維凝膠上形成dútè的斑點圖譜。
3.dànbáizhì檢測與分析
在2D凝膠電泳完成后,dànbáizhì通過染色方法(如考馬斯亮藍染色或銀染)進行可視化,然后使用圖像分析軟件對dànbáizhì斑點進行定量分析,質譜分析接著用于dànbáizhì的鑒定。
二、2Ddànbáizhì組學的挑戰(zhàn)
盡管2Ddànbáizhì組學在分離能力上具有顯著優(yōu)勢,但也存在一些技術限制。樣本的復雜性和dànbáizhì的溶解性可能影響分辨率,另外,對高分子量和極低豐度dànbáizhì的分離能力仍然是一個挑戰(zhàn)。重復性和樣本制備的標準化也是研究人員需要特別注意的問題。為應對這些挑戰(zhàn),研究人員不斷發(fā)展新技術。例如,結合質譜技術和生物信息學工具,可以提高dànbáizhì鑒定的jīngquè性和效率。通過這些創(chuàng)新,2Ddànbáizhì組學的應用范圍得以擴展,并為生物學研究提供了更為深入的見解。
百泰派克生物科技致力于提供高質量的二維凝膠電泳服務,擁有經(jīng)驗豐富的科研團隊,確保實驗結果的高效性和準確性。無論是在基礎研究還是應用研究領域,我們的服務都能為客戶提供quánfāngwèi的支持,歡迎廣大科研人員與我們合作,期待與您攜手探索生命科學的更多可能性。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優(yōu)勢:
1.采用目前世界上優(yōu)良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優(yōu)勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優(yōu)勢:
1.技術優(yōu)良,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數(shù)量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產商提高生物藥物品質。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務;
3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
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