限制性內切酶是一種能夠識別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列，并在特*位置切割DNA鏈中的磷酸二酯鍵的一類酶，簡稱限制酶。高保真限制性內切酶是一類經過基因工程改造的分子生物學工具酶，能夠特異性識別并切割雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列，同時在反應過程中保持較低的非特異性切割活性。
優勢：
高切割效率：基因工程改造提升酶促反應速率，單位時間內可處理更多樣本。
寬反應條件范圍：耐受pH、離子強度波動，兼容不同來源DNA樣本。
高保真限制性內切酶的應用：
1、基因工程：用于構建基因表達載體，實現外源基因的精準插入；在基因敲除/替換實驗中，通過特異性切割目標序列完成基因編輯。
2、分子克隆：切割PCR產物與載體DNA，通過黏性末端互補連接實現重組DNA分子構建，平末端產物則適用于T4 DNA連接酶介導的連接反應。
3、表觀遺傳學研究：對DNA甲基化狀態敏感的酶可用于分析甲基化位點對基因表達的影響。
4、測序與SNP鑒定：作為測序預處理工具，通過產生可預測的酶切片段輔助DNA序列分析；在ddPCR中用于靶向片段富集。
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