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供貨周期 | 一周 | 規格 | T25瓶/2冷凍管 |
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貨號 | YS708C | 主要用途 | 科研實驗 |
細胞名稱:LuNBL-7貂肺上皮細胞ATCC
細胞代次:P4
細胞規格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)
細胞凍存:無血清凍存液
細胞傳代:第一次建議1:2
細胞收到后處理
培養至良好狀態后灌滿培養液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,消毒后放到超凈臺內嚴格無菌操作,將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據,不提供照片默認收到狀態良好。(注意密封培養瓶放入培養箱時要將蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶的培養基,另外一瓶用自己配的培養基,以便進行對比培養)
到貨處理
用75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養瓶外部,觀察細胞生長情況。
1.不要打開培養瓶蓋,將細胞放入 37℃培養箱中靜置 3-4 小時后再做處理,以穩定細胞狀態。
2.通過離心的方式收集細胞,然后將細胞沉淀加入5-8ml的培養基輕輕吹打均勻后移入新的T25培養瓶中培養。
培養時的注意技巧
1.換液前將培養瓶豎在培養箱靜置1小時左右,輕輕吸掉3ml左右培養基,然后加入3ml的新鮮培養基,混勻后放入培養箱中培養。
2.如果細胞密度比較稀,培養基沒有明顯變化,可以加入500ul的FBS混勻后,豎著培養。
3.傳代時,先按照換液步驟處理,吸掉3ml左右培養基后,加入10ml的新鮮培養基,混勻后分2個T25培養瓶培養。
4.培養一周左右可以離心一次,以去除一些死細胞。
5.該細胞比較脆弱,培養過程中不要頻繁拿出來觀察,以免影響細胞的生長。
6.該細胞的生長環境比較敏感,需使用較好的血清培養。
7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養.
注意事項:有些細胞比較特殊,如貼壁不牢,在運輸過程中發生容易細胞脫落,這是正常現象。請將培養瓶所有培養液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(后期對比培養),沉淀加入消化液1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml培養基終止反應。再離心,棄上清,加1-2ml培養基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的培養基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養。
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