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當(dāng)前位置:西安暉瑞生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>Alexa Fluor 532蛋白標(biāo)記試劑盒的性能特點(diǎn)
產(chǎn)品介紹:
一、產(chǎn)品概述
Alexa Fluor 532蛋白標(biāo)記試劑盒是一種用于將熒光染料高效、穩(wěn)定地偶聯(lián)至蛋白分子的實(shí)驗(yàn)工具。所包含的Alexa Fluor 532染料具有明亮的橙黃色發(fā)射光譜,激發(fā)峰約為532 nm,發(fā)射峰約為554 nm,適用于多種常見激光光源(如532 nm固態(tài)激光器或Ar離子激光器的532 nm線)。該試劑盒可實(shí)現(xiàn)對(duì)抗體、酶、受體蛋白及其他生物大分子的標(biāo)記,從而在后續(xù)的熒光檢測(cè)、成像和定量分析中提供穩(wěn)定的信號(hào)輸出。
二、標(biāo)記原理
Alexa Fluor 532分子通常通過活化的琥珀酰亞胺酯(NHS ester)與蛋白分子上的伯胺基團(tuán)反應(yīng)生成穩(wěn)定的酰胺鍵。蛋白分子中賴氨酸殘基側(cè)鏈上的氨基是主要反應(yīng)位點(diǎn)。標(biāo)記過程一般在中性至弱堿性緩沖體系(pH 7.2–8.5)中進(jìn)行,以保證NHS酯的反應(yīng)活性并減少水解。
整個(gè)偶聯(lián)反應(yīng)步驟相對(duì)簡(jiǎn)單,反應(yīng)時(shí)間短,可在室溫下完成,反應(yīng)結(jié)束后可通過試劑盒提供的純化介質(zhì)去除未結(jié)合的染料,從而獲得高純度的熒光標(biāo)記蛋白。
三、性能特點(diǎn)
高熒光效率:Alexa Fluor 532具有較高的摩爾消光系數(shù)與量子產(chǎn)率,能夠在低標(biāo)記度下提供強(qiáng)信號(hào)。
光穩(wěn)定性良好:染料分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,在常規(guī)顯微成像或流式檢測(cè)條件下不易褪色,可滿足長時(shí)間檢測(cè)的需求。
標(biāo)記反應(yīng)條件溫和:在生理?xiàng)l件下進(jìn)行偶聯(lián),不易破壞蛋白的結(jié)構(gòu)和活性。
光譜特性兼容性好:與常用熒光團(tuán)如FITC、Cy3等相比,Alexa Fluor 532的發(fā)射波長區(qū)間與多色檢測(cè)中的通道分離度較高,減少信號(hào)串?dāng)_。
試劑盒組件齊全:包含反應(yīng)所需的緩沖液、純化材料和詳細(xì)的使用說明,方便實(shí)驗(yàn)人員直接操作。
四、應(yīng)用范圍
Alexa Fluor 532蛋白標(biāo)記試劑盒適合多種生物分析與檢測(cè)場(chǎng)景,包括:
流式細(xì)胞分析:用于標(biāo)記抗體或配體,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞表面分子定量檢測(cè)。
熒光顯微成像:適用于共聚焦顯微鏡、寬場(chǎng)熒光顯微鏡等成像平臺(tái)。
免疫檢測(cè):可用于ELISA、免疫印跡及免疫沉淀等技術(shù)中的熒光信號(hào)檢測(cè)。
蛋白質(zhì)相互作用研究:通過熒光標(biāo)記跟蹤分子結(jié)合與解離過程。
高通量分析:與多色檢測(cè)體系配合,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣本中多靶標(biāo)的同時(shí)檢測(cè)。
五、操作注意事項(xiàng)
緩沖液選擇:標(biāo)記反應(yīng)前需將蛋白溶液置換為不含伯胺的緩沖體系,如PBS(不含胺)或碳酸鹽緩沖液,避免Tris等含氨基組分影響偶聯(lián)效率。
蛋白濃度與標(biāo)記度控制:蛋白濃度通常保持在1–10 mg/mL范圍,標(biāo)記度建議控制在適中水平,避免過量標(biāo)記影響蛋白功能。
避光操作:Alexa Fluor 532對(duì)光較為敏感,標(biāo)記反應(yīng)及純化過程需盡量避光,以減少光降解。
儲(chǔ)存條件:標(biāo)記完成后的蛋白應(yīng)分裝保存于4°C短期保存或-20°C長期保存,避免反復(fù)凍融。
純化充分:確保游離染料被去除,以減少背景信號(hào)并提高檢測(cè)靈敏度。
六、光譜信息與檢測(cè)建議
激發(fā)波長(λ_ex):約532 nm
發(fā)射波長(λ_em):約554 nm
建議使用的濾光片組合:激發(fā)濾光片 525 ± 15 nm,發(fā)射濾光片 555 ± 20 nm
適配檢測(cè)平臺(tái):流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡、熒光酶標(biāo)儀等。
七、總結(jié)
Alexa Fluor 532蛋白標(biāo)記試劑盒以其較高的熒光亮度、良好的光穩(wěn)定性以及與常見光學(xué)系統(tǒng)的高度匹配性,能夠?yàn)榭蒲腥藛T在蛋白標(biāo)記與檢測(cè)領(lǐng)域提供可靠工具。通過優(yōu)化的反應(yīng)體系和
產(chǎn)品名稱:Alexa Fluor 532蛋白標(biāo)記試劑盒
產(chǎn)地信息:陜西 · 西安
包裝規(guī)格:產(chǎn)品提供瓶裝形式,常規(guī)包裝規(guī)格包括100 mg、250 mg 和 500 mg,亦可根據(jù)需求定制。
產(chǎn)品形態(tài):可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提供為固體、粉末或溶液狀態(tài),便于不同應(yīng)用場(chǎng)景。
儲(chǔ)存建議:為保持產(chǎn)品的活性與穩(wěn)定性,建議低溫冷藏保存。
廠家信息
西安暉瑞生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)和銷售為一體的科研試劑企業(yè),專注于功能分子與高分子材料的開發(fā)與定制服務(wù)。公司擁有成熟的合成技術(shù)體系和豐富的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),產(chǎn)品類型覆蓋多個(gè)研究方向,廣泛服務(wù)于高校、科研院所及企業(yè)實(shí)驗(yàn)室。
主營產(chǎn)品包括:合成磷脂、PEG衍生物、嵌段共聚物、順磁/超順磁納米顆粒,金納米材料(納米金、金納米棒)、近紅外染料及其標(biāo)記物、熒光標(biāo)記的葡聚糖、BSA、鏈霉親和素、多種蛋白交聯(lián)劑、小分子PEG化合物等
此外,公司還提供點(diǎn)擊化學(xué)試劑、樹枝狀聚合物、環(huán)糊精、大環(huán)配體、熒光量子點(diǎn)、透明質(zhì)酸修飾物、石墨烯及其氧化物、碳納米材料(包括碳納米管、富勒烯)等前沿材料,并支持客戶根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)進(jìn)行分子結(jié)構(gòu)與功能的定制開發(fā)。
暉瑞生物以技術(shù)驅(qū)動(dòng)和服務(wù)導(dǎo)向?yàn)楹诵睦砟睿铝τ跒榭蒲腥藛T提供穩(wěn)定可靠的材料解決方案,助力科學(xué)研究高效推進(jìn)。
本資料由編輯kx整理,僅供科研用途參考。
產(chǎn)品推薦:
Alexa Fluor 555 CTB
Annexin V Alexa Fluor 680
115532-49-5,Tetramethylrhodamine
92557-80-7,fam NHS,5-fam NHS
sulfo Cy7.5 Tyramide,sulfo Cy7.5 TSA
TCO-PEG3-Mal,1809356-72-6
AF488 蛋白標(biāo)記試劑盒
BODIPY 558/568 Phalloidin
DBCO-PEG14-NHS
AF 488 Hydrazide,2500973-94-2
CAS:510758-19-7,5-fam YNE
TCO-PEG24-DOPE
Tetrazine-PEG5-GGG-NH2
Annexin V Pacific Blue
Alexa Fluor 532蛋白標(biāo)記試劑盒
1222842-02-5,6-RhFlu(Nap).HCl
fam N3,F(xiàn)am-azide
AF546 TSA,AF546 Tyramide
OG488 Tyramide,Oregon Green 488 Tyramide
FITC Phalloidin,F(xiàn)luorescein Phalloidin
AF Plus 750 Phalloidin
TCO-MMAE,TCO MonoMethyl auristatin E
6-TET-tyramide
AF555 蛋白標(biāo)記試劑盒
268725-21-9,BODIPY 630-X
TET810-tyramide
TCO-Doxorubicin
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