Roche 11685597910 生wu素RNA標記混合物
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Roche 11685597910 生wu素RNA標記混合物,產品簡介:
產品品牌:Roche
產品貨號:11685597910
產品名稱:生wu素RNA標記混合物
產品規格:40 uL
產品說明:
說明
一般描述
用于生wu素-16-UTP標記RNA的便捷核苷酸混合物。
特異性
熱滅活:添加2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0)以終止反應。
應用
生wu素RNA標記混合物已用于通過生wu素-16-UTP與SP6、T7和T3 RNA聚合酶體外轉錄的RNA標記。[1][2]
生wu素標記RNA還應用于一系列雜交技術:
DNA印跡
RNA印跡[3]
斑點印跡
菌落及菌斑清除
RNA酶保護試驗
原位雜交[4]
微陣列雜交
RNA pull down試驗[1]
特點和優勢
組份
10x 濃縮液包含: ATP、CTP、GTP各10mM,6.5mM UTP,3.5mM生wu素-16-UTP,pH 7.5
質量
結合DIG RNA標記試劑盒進行了功能檢測。
原理
生wu素標記的、確定長度的單鏈RNA探針通過體外轉錄產生。生wu素-16-UTP通過SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大約每20到25個核苷酸的間隔插入轉錄產物中,轉錄條件如下所述。生wu素RNA標記混合物專為Roche SP6、T7和T3 RNA聚合酶設計,隨附優化的轉錄緩沖液。
制備說明
試驗時間:135分鐘
樣品材料
線性化質粒DNA:待轉錄的DNA將會被克隆至含有SP6,T7或T3 RNA聚合酶啟動子并相鄰于多接頭的合適轉錄載體的多接頭位點。對于′流失′轉錄本的合成,質粒是通過限制性酶進行線性化的。應使用限制性酶生成的5′-突出;應避免3′突出。線性化模板DNA應采用酚氯仿萃取和乙醇沉淀法純化,以避免RNase污染。為′完成′轉錄,使用了環狀質粒DNA
PCR產物:含有RNA聚合酶啟動子序列的PCR片段,也可以作為轉錄模板。推薦在轉錄前通過凝膠電泳純化正確的PCR片段。
標記效率:μ通過1μg線性模板DNA和RNA聚合酶進行標準標記反應,產生大約10μg全長生wu素標記RNA。在斑點試驗中,聯用抗生wu素-AP與化學發光底物CSPD可檢測低至0.3pg的生wu素標記RNA。
其他說明
僅用于生命科學研究。不可用于診斷。
產品訂購信息:
Roche 11685597910 生wu素RNA標記混合物 40 uL