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帶電氣溶膠檢測器在mRNA-LNP脂質組分檢測中的應用

閱讀:385      發布時間:2025-3-17
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  脂質納米顆粒(LNP)作為mRNA疫苗的遞送系統,近年來在疫苗研發和生產中發揮了關鍵作用。它們不僅提高了mRNA疫苗的穩定性和細胞遞送能力,還使得mRNA技術得以在生物制品領域實現重大突破。然而,LNP的脂質組分檢測一直是疫苗質量控制中的難點之一。帶電氣溶膠檢測器(CAD)作為一種新型通用探測器,為這一問題的解決提供了有力支持。

  一、LNP與mRNA疫苗

  LNP通常由四種類型的脂質體組成:具有胺官能團的陽離子脂質、脂質-聚乙二醇偶聯物、膽固醇和兩性離子輔助磷脂。這些脂質體通過離子相互作用與mRNA結合,形成穩定的復合物,從而實現mRNA的有效遞送。起初上市的兩款mRNA疫苗,即Moderna的mRNA-1273和Pfizer-BioNTech的BNT162b2,就采用了LNP作為遞送系統。

  二、帶電氣溶膠檢測器(CAD)的原理與特點

  帶電氣溶膠檢測器是一種新型的通用探測器,具有與梯度洗脫的兼容性、不依賴于物質的結構特性和電離效率的響應值,以及檢測非揮發性和半揮發性物質的能力。當CAD檢測器與高效液相色譜(HPLC)結合使用時,HPLC淋洗液在CAD檢測器的霧化室中通過氮氣碰撞霧化。含有分析物的較小液滴在室溫下干燥形成溶質顆粒,粒子表面通過與帶電的氮氣碰撞而帶正電。隨后,具有低負電壓的離子阱裝置以高遷移速率去除多余的帶電氮,而具有低遷移速率的帶電分析物顆粒則將其電荷轉移到顆粒收集器。最后,通過高靈敏度的靜電檢測裝置測量分析物的電荷并將其轉換為電信號,信號強度與溶質的質量成正比。

帶電氣溶膠檢測器

 

  三、CAD在mRNA-LNP脂質組分檢測中的應用

  CAD檢測器因其高度靈敏性和廣泛的檢測范圍,在mRNA-LNP脂質組分檢測中表現出色。中國食品藥品檢定研究院(中檢院)聯合賽默飛在《Vaccines》雜志上發表的一篇文章中,就詳細介紹了他們開發并驗證的一種HPLC-CAD方法,用于鑒別和定量測定一款mRNA-LNP疫苗中四種脂質的含量。該方法使用C18色譜柱,以0.01M乙酸三乙胺水溶液和0.01M乙酸三乙胺甲醇溶液為流動相,流速為1.0mL/min,柱溫為55℃,蒸發溫度為50℃,進樣體積為10μL。實驗結果表明,該方法可靠、準確、可重復、無干擾,適用于mRNA類疫苗中脂質組分的有效控制。

  此外,團隊也使用了UHPLC-CAD檢測LNP組分及降解產物,進一步證明了CAD檢測器在mRNA-LNP脂質組分檢測中的優勢。

  四、CAD在mRNA疫苗質量控制中的重要性

  脂質體在儲存和運輸過程中容易聚集和降解,從而影響COVID-19mRNA疫苗的效率和安全性。因此,對單個脂質組分進行鑒別和定量檢測不僅支持工藝和配方開發,也是疫苗生產的關鍵質量屬性。CAD檢測器因其高度靈敏性和廣泛的檢測范圍,能夠準確測定LNP中各個脂質組分的含量,為mRNA疫苗的質量控制提供了有力保障。

  帶電氣溶膠檢測器在mRNA-LNP脂質組分檢測中展現出了顯著的優勢和廣闊的應用前景。隨著mRNA疫苗技術的不斷發展和產業化進程的加速推進,CAD檢測器將在mRNA疫苗的質量控制中發揮越來越重要的作用。未來,我們可以期待CAD檢測器在更多領域和場景中展現出其價值和潛力。

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