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細胞計數板的原理和使用方法

時間:2024-9-20 閱讀:1369
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一、細胞計數板的原理


細胞計數板是一種用于對細胞進行計數的工具。它通常由一塊特制的載玻片和一個蓋玻片組成。載玻片上刻有精確的方格網,通過顯微鏡觀察,可以對位于方格內的細胞進行計數。


計數板的計數原理基于一定體積的細胞懸液在計數區域內的分布情況。計數板上的方格被設計成特定的尺寸,使得在已知的體積范圍內,可以通過計數方格內的細胞數量來推算出細胞懸液的濃度。


二、細胞計數板的使用方法


  1. 準備工作
    • 準備細胞計數板、蓋玻片、移液器、細胞懸液等。

    • 確保計數板和蓋玻片清潔、干燥,無劃痕。

  2. 制備細胞懸液
    • 將待計數的細胞樣品制備成均勻的細胞懸液。可以通過輕輕吹打、攪拌或使用適當的分散劑來確保細胞均勻分散。

  3. 加樣
    • 使用移液器吸取適量的細胞懸液,小心地滴加在計數板的計數區域上。注意不要產生氣泡,也不要讓液體溢出計數區域。

    • 通常在計數板的兩側分別滴加細胞懸液,然后輕輕蓋上蓋玻片,使其與計數板緊密貼合。

  4. 顯微鏡觀察
    • 將計數板放在顯微鏡的載物臺上,使用適當的物鏡進行觀察。一般使用低倍物鏡(如 10×)找到計數區域,然后切換到高倍物鏡(如 40×)進行細胞計數。

  5. 計數細胞
    • 計數板上通常有兩種類型的方格:大方格和小方格。大方格又被分為多個小方格。

    • 計數時,只計數位于大方格四個角和中央的中方格內的細胞。對于壓線的細胞,只計數上側和左側線的細胞,避免重復計數。

    • 分別計數不同區域的細胞,取平均值以提高計數的準確性。

  6. 計算細胞濃度
    • 根據計數板的規格和計數的細胞數量,可以計算出細胞懸液的濃度。

    • 例如,如果計數板上一個大方格的體積為 0.1mm3,計數了 5 個大方格內的細胞總數為 N,則細胞濃度(個 /mL)=N×10?。

  7. 清洗和保存
    • 計數完畢后,及時清洗計數板和蓋玻片,避免細胞殘留影響下次使用。

    • 將計數板和蓋玻片干燥后,存放在清潔、干燥的地方。


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