諾博萊德 植物細胞核和細胞質提取試劑盒 蛋白提取

NobleRyder P5125 植物細胞核和細胞質提取試劑盒-酶法

產品貨號：P5125

產品名稱：植物細胞核和細胞質提取試劑盒-酶法

產品規格：50T/100T

產品簡介：

中文名稱：植物細胞核和細胞質提取試劑盒-酶法

規格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder P5125 植物細胞核和細胞質提取試劑盒-酶法

適用樣本：植物

注：

1. 試劑盒2-8℃保存，開蓋后組份按要求條件保存。

2. 試劑拆封后請盡快使用完！

產品簡介：

植物細胞核和細胞質提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種植物細胞和各種實體植物組織，如葉片、根、種子等植物組織中提取細胞核和細胞質。提取過程簡單方便，可在 1 小時內完成。制備的細胞核和細胞質不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。

本試劑盒采用酶法提取，酶法提取制備的回收率提高，純度高，保持天然活性，但是耗時較長。

非酶法的提取試劑盒提取過程簡單方便，速度快，可在1 小時內完成，而且絕少交叉污染，但是回收率相比酶法較低。如果需要更加快捷的提取試劑盒，可以選擇非酶法的提取試劑盒，對提取速度沒有要求的話，可以選擇酶法提取試劑盒。請根據實際需要選擇試劑盒。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、渦旋混勻器、Dounce勻漿器、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、離心管、吸頭、細胞篩（100um）、一次性手套

使用方法：

一、使用注意事項：

1、旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

2、實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

3、可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑。

二、操作步驟

1、取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的 100-200mg 植物組織樣本用shou術剪刀盡可能剪碎（也可用鋒利的刀片劃成盡可能小的碎片）。

2、加入500ul 洗滌液A 充分混勻。

3、在 30℃條件下靜置 15 分鐘。

4、在2000×g 條件下離心10 分鐘，棄上清，收集沉淀。

5、在沉淀中加入500ul 提取液B，充分混勻。

【注】：

①培養細胞1000×g 條件下離心5 分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集細胞后用PBS洗滌2 次，然后直接加入提取液B 重懸。

②大約每300ul 細胞壓積中加入1ml 提取液B。

③根據實際樣本體積調整提取液用量，一般試劑是樣本體積的2-3 倍，充分淹沒樣本即可。

6、將提取液B 樣本懸液置振蕩器上37℃-45℃或室溫振蕩24-72 小時。

【注】：

①使用振蕩器/搖床的較低轉速，提取液能輕微晃動即可。沒有振蕩條件也可以不振蕩，中間每隔幾小時用移液器吹打混勻即可。

②根據下游核和胞質的應用選擇合適的溫度，最高溫度為55℃時制備速度最快。但是溫度過高會影響樣本活性，請根據下游應用選擇溫度。

③不同類型的植物樣本需要處理的時間差異較大。擬南芥較易處理，鮮嫩葉片較易處理，年齡小的樣本處理時間短。部分細胞壁較厚的植物類型可能需要處理更長時間。可以延長至 72 小時以上處理以提高得率。

7、在2000×g 離心5 分鐘，棄上清，收集沉淀。

【注】：

①有條件的話最好用100um 細胞篩網過濾提取液 B 處理液后，收集濾液再離心。

②沒有細胞篩可以不過濾。

8、用PBS 洗滌沉淀一次。（在2000×g 離心 5 分鐘）

9、在沉淀中加入500ul 試劑C 重懸沉淀，充分混勻。用勻漿機/勻漿器勻漿。

10、置 4℃振蕩20-30 分鐘。

①使用振蕩器/搖床的較低轉速，提取液能輕微晃動即可。

②沒有振蕩條件也可以不振蕩，在 2-8℃靜置，稍微延長處理時間，中間每隔幾小時用移液器吹打混勻即可。

11、在 4℃，800×g 力條件下離心5 分鐘。

12、移除上清至另一干凈離心管。上清為細胞質部分，沉淀為細胞核。

13、用相應的緩沖液重懸細胞核沉淀，將兩個樣本置冰箱備用或直接用于下游實驗。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得優良實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹di清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

 植物細胞核和細胞質提取試劑盒 蛋白提取

產品訂購信息：

P5125  植物細胞核和細胞質提取試劑盒-酶法  50T/100T