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類胡蘿卜素(carotenoid)含量試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 樣

類胡蘿卜素含量試劑盒光合系列

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

類胡蘿卜素是一種脂溶性且具有營養特性的化合物，給植物和動物提供天然色素，是重要的抗氧化劑，并有能力轉換為必需維生素。類胡蘿卜素可預防細胞，組織和基因損毀，增強身體免疫系統，抵御感染，減少癌癥風險，保護心臟。

測定原理：

樣品通過混合有機溶劑萃取，類胡蘿卜素與非類胡蘿卜素成分分離，在 448nm 處有特征吸收峰。

組成：

自備儀器和用品：

天平、烘箱，100 目篩、三角瓶或燒杯、漏斗，紗布、玻璃試管、可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿、正己烷

樣本處理：

提取：稱取 0.5g 樣本，加入 1.5ml 試劑一，冰浴勻漿，超聲破萃取 15min(可改用振蕩金屬浴），15000g 25℃離心 5min，取上層液轉入 10ml 離心管中，沉淀用 1.5ml 試劑一重復提取 2 次，并將上層液并入上述 10ml離心管中作為提取出的非皂化類胡蘿卜素樣品。

皂化：向上述非皂化類胡蘿卜素樣品中加入 2ml 試劑二，混勻，25℃室溫避光皂化過夜，皂化完成后，加

入 3ml 試劑三，混勻后，5000g 25℃離心 5min，將上層類胡蘿卜素提取相轉入 5ml 離心管，用正己烷定容到 5ml，置冰上待測。

測定步驟：

	空白管	測定管
樣本（μl）		1000
正己烷（μl）	1000
于 1ml 玻璃比色皿，迅速測定 450nm 處吸光值A，分別記為 A 空白管和A 測定管，△A=A 測定管-A 空白管

注意：空白管只需測定一次。

計算公式：

類胡蘿卜素含量（μg/g 鮮重）= △A×V 樣總÷（ε×d）÷W

= 31.25×△A÷W

V 樣總：提取液總體積，5ml；ε：類胡蘿卜素消光系數，0.16；d：比色皿光徑，1cm； W：樣本質量，g

注意事項：

提取液易揮發，有毒性，操作時做好防護措施。

測定必須能迅速，防止揮發造成誤差。

類胡蘿卜素含量試劑盒光合系列

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