諾博萊德 寡核苷酸純化試劑盒 核酸提取

Oligo Purification Kit寡核苷酸純化回收試劑盒

目錄號:43014

產品內容：

自備試劑：

無水乙醇

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

產品簡介：

本試劑盒使用特殊的結合緩沖液能夠高效純化>15nt 的單鏈或者雙鏈 DNA 和 RNA。特別適用于從標記反應（地gao辛標記，同位素標記，生wu素標記等）混合物中回收小片段標記探針，去除未反應的核苷酸、短 oligos、染料、酶、鹽離子等。典型的回收率高達 80-90%，每個離心吸附柱每次可吸附的 DNA  量為 10µg  。使用本試劑盒回收的 RNA 或者 DNA 可適用于 in Situ Hybridization、Northern blot、RNAi、Gel shift assay、 Ligation、Sequencing、Microarray analysis 等實驗。

產品特點：

1.        快速：步驟少，操作簡便，整個操作僅需 15 分鐘。

2.        高效：獨te配方使本產品比一般試劑盒回收效率大大提高，并且不會抑制下游反應。

3.        適用范圍廣：適用于回收單鏈或者雙鏈 DNA 和 RNA。雖然本試劑盒推薦用于回收小片段或者寡聚核苷酸(>15nt)，但是也可以高效回收<10kb 的較大片段 DNA 或者 RNA。

注意事項：

1.   Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩定性，消除高溫潮濕或其他不良環境因素對吸附柱造成的影響。收到貨后 2 個月內，不用做柱平衡。

2.   使用前請先檢查Buffer BL、Buffer OB 是否出現渾濁，如有混濁現象，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復澄清。

操作步驟

第一次使用前，請先在 Buffer RW 瓶中加入無水乙醇，并打對勾標記，加入體積請參照瓶上的標簽。第一次使用前，請先在 Buffer OB 瓶中加入異丙醇! 加入體積請參照瓶上的標簽。

1.  柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 100 ul 平衡液 Buffer BL，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液，將吸附柱重新放回收集管中。（請使用當天處理過的柱子）

2.   加結合液：估計樣品體積，向其中加入 10 倍體積結合液Buffer OB，溫和地充分混勻。

（注意：如果回收的片段>100bp，只需要加 5 倍體積 Buffer OB。）

（注意：如果樣本體積小于 50ul,用 RNase-Free H2O 補齊 50ul,以提高回收效率。）

3.   吸附：將上一步所得溶液加入一套吸附柱中，室溫放置 1 min，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液。

（ 注意：吸附柱容積為 750ul，若樣品體積大于 750ul 可分批加入）

4.   漂洗：加入 500ul Buffer RW，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液。

5.  二次漂洗：重復操作步驟 4。

6.  干燥：將離心吸附柱于 12,000 rpm 離心 2 min，甩干殘留漂洗液。

7.   洗脫：將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul RNase-Free H2O，室溫放置 2 min，12,000 rpm 離心 1 min，收集 DNA 片段。

（注意：為增加回收效率，可將洗脫液在 60℃預熱，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min，再次離心收集。）

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