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北京諾博萊德科技有限公司
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當前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>生化試劑>>P450系列檢測試劑盒>> DA6010細胞色素b5含量測定試劑盒 P450系列

細胞色素b5含量測定試劑盒 P450系列

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號DA6010

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質經銷商

所  在  地北京市

更新時間:2025-07-18 10:02:02瀏覽次數:133次

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供貨周期 現貨 規格 100T/96S
貨號 DA6010 應用領域 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 細胞色素b5含量測定試劑盒
細胞色素P450 酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。
細胞色素b5含量測定試劑盒 P450系列


細胞色素b5Cytochrome b5含量測定試劑盒說書

微量法 100T/96S

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

細胞色素P450 酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。細胞色素 P450 和細胞色素b5 P450 酶系的兩個血紅素蛋白,其比值的變化與 P450 代謝活性密切相關。

測定原理:

氧化型細胞色素 b5 經連二亞硫酸鈉還原后,在 424nm 處有最大吸收峰,通過測定 424nm  490nm 處吸光值的差異,即可計算細胞色素b5 的含量。

細胞色素b5含量測定試劑盒   P450系列

組成:

產品名稱

DA6010-100T/96S

Storage

試劑一:粉劑

2

4℃

試劑二:液體

1

4℃

試劑三:粉劑

1

4℃

說明書

一份

 

試劑一:粉劑×2 瓶,4℃保存。臨用前各加 100ml 蒸餾水,充分溶解。

工作液配制:

臨用前配制,戴一次性手套,小心打開試劑三瓶蓋,加試劑二 20ml 充分溶解,4℃避光可保存 1 周。


具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準


自備儀器和用品:

普通離心機,超速離心機、可調式移液槍、紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、和蒸餾水。

樣品中細胞色素 b5 提取

1除去細胞核,線粒體等大分子物質:稱約 0.5g 組織,加入 1ml 試劑一,冰上充分研磨,10 000g 4℃ 30min,取上清液,轉入超速離心管中。

2粗制微粒體:100 000g4℃離心 60min,棄上清液。

3除血紅蛋白等雜質:向步驟 2 的沉淀中加 1ml 試劑一,蓋緊后充分震蕩溶解,100 000g 離心 30min,棄上清液。

4待測液:向步驟 3 的沉淀中加試劑二 0.5ml,蓋緊后充分震蕩溶解,即待測液,該待測液需當天測定。

細胞色素 b5 含量測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱 30 min

2. 工作液置于 25℃水浴中預熱 30 min

3. 空白管: 1ml 玻璃比色皿,加入 10 μl 蒸餾水,200μl 工作液,室溫靜置 2 min424nm  490nm 處吸光值,424nm 處吸光值記為A 空白管 1490nm 處吸光值記為A 空白管 2A 空白管= A 空白管 1- A 白管 2

4. 測定管: 1ml 玻璃比色皿,加入 10 μl 待測液,200μl 工作液,室溫靜置 2 min424nm  490nm 處吸光值,424nm 處吸光值記為A 測定管 1490nm 處吸光值記為A 測定管 2

A 測定管= A 測定管 1- A 測定管 2

注意:只需要做一個空白管。

樣品細胞色素 b5 含量計算公式:

a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1) 按蛋白濃度計算

細胞色素b5 含量(nmol/mg prot) = (A 測定管-A 空白管)÷(ε×d)×V 反總÷Cpr×V 

= 122.8×(A 測定管-A 空白管)÷Cpr

(2) 按樣本質量計算

細胞色素b5 含量(nmol/g 鮮重)= (A 測定管-A 空白管)÷(ε×d)×V 反總×V 樣總÷V ÷W

= 61.4×(A 測定管-A 空白管)÷W

ε:還原型細胞色素b5 納摩爾消光系數,171×10-6 L/nmol/cmd:比色皿光徑(cm),1cm V 反總:反應體系總體積,210 μl =2.1×10-4 LCpr:待測液蛋白質濃度(mg/ml),需要另外測定;V 樣:加入反應體系中待測液體積,10 μl=0.01 mlV 樣總:待測液總體積,0.5 mlW:樣品質量(g)。

b. 使用 96 孔板測定的計算公式如下

(1) 按蛋白濃度計算

細胞色素b5 含量(nmol/mg prot) = (A 測定管-A 空白管)÷(ε×d)×V 反總÷Cpr×V 

= 245.6×(A 測定管-A 空白管)÷Cpr

(2) 按樣本質量計算

細胞色素b5 含量(nmol/g 鮮重)= (A 測定管-A 空白管)÷(ε×d)×V 反總×V 樣總÷V ÷W

= 122.8×(A 測定管-A 空白管)÷W

ε:還原型細胞色素b5 納摩爾消光系數,171×10-6 L/nmol/cmd96 孔板光徑(cm),0.5cm V 反總:反應體系總體積,210 μl =2.1×10-4 LCpr:待測液蛋白質濃度(mg/ml),需要另外測定;V 樣:加入反應體系中待測液體積,10 μl=0.01 mlV 樣總:待測液總體積,0.5 mlW:樣品質量(g)。

細胞色素b5含量測定試劑盒   P450系列


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