產(chǎn)品簡介：

本試劑是利用 PAGE 膠過柱法回收 miRNA，可用于回收 200nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20nt 左右的 microRNA(miRNA)分子。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.可以回收 15-3000nt 范圍內(nèi)的各種長度的 RNA，包括 100nt 以下的 miRNA片段。

2.柱式回收法，比沉淀法更見簡單快捷。

3.miRNA 回收率在 70%左右。

4.即開即用，操作簡單，用戶不需要自備任何試劑。

5.擴(kuò)容性好，可小規(guī)模操作，也可以大規(guī)模操作。

6.本試劑盒可以回收 30 次的 miRNA。

7.miRNA PAGE 膠回收試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

保存和運(yùn)輸

常溫運(yùn)輸及保存，有效期為一年。

自備試劑

PAGE 膠、離心管、移液槍頭

使用方法：

1.切取含 miRNA 片段的 PAGE 凝膠 100mg 左右(盡可能多地把多余的膠切除，否則會(huì)影響回收效率），放入 1.5mL 塑料離心管中，用先在酒精燈上口燒密閉的移液槍頭盡可能將其搗碎，搗得越細(xì)越好。之后加入 300μL miRNA PAGE膠回收溶液 A。

2.將離心管水平放置并室溫?fù)u晃 3 小時(shí)以讓 miRNA 從 PAGE 凝膠中擴(kuò)散出來。如果回收的 RNA 片段長度超過 100nt，搖晃時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長。提高溫度到45-65℃，RNA 擴(kuò)散速度會(huì)增加。

3.12000-15000g 室溫離心 1-2 分鐘，將含 RNA 的上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的 5mL

的塑料離心管中。

4.加入 300μL miRNA PAGE 膠回收溶液 B、300μL miRNA PAGE 膠回收溶液 C 和 750μL miRNA PAGE 膠回收溶液D 混合均勻?qū)㈦x心管中的溶液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，每次轉(zhuǎn)移后都先靜置 3 分鐘，然后再 12000-15000g 離心1 分鐘，倒掉收集管中的液體。

5.加入 700μL 通用洗柱液于離心吸附柱中。12000-15000g 離心 1 分鐘，倒棄收集管中的廢液。之后再 12000-15000g 離心半分鐘以去除離心吸附柱中的殘留液體。

6.將離心吸附柱置于一新的干凈的離心管中，加入 25-50μL RNA 洗脫液，靜置 3分鐘。12000-15000g 離心 1 分鐘，離心管底部所得溶液即為純化的 miRNA溶液，可立即用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)或者放冰箱長期保存。

7.可以 PAGE 電泳檢查回收效率-最好使用基因的高靈敏的超快核酸銀染試劑染色以節(jié)約 miRNA 樣品的用量。

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