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ELSD蒸發(fā)光散射檢測器的操作秘訣

閱讀:593      發(fā)布時間:2022-8-11
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   ELSD蒸發(fā)光散射檢測器是通用型檢測器,可以檢測沒有紫外吸收的有機物質,如人參皂苷、黃芪甲苷等。不同于其他檢測器,ELSD能在多溶劑梯度的情況下獲得穩(wěn)定的基線,使得分辨率更好、分離速度更快。另外,因為ELSD的響應不依賴于樣品的光學特性,所以ELSD檢測時樣品不要求帶有發(fā)色團或熒光基團。
 
  步驟1:霧化
 
  經HPLC分離的柱洗脫液進入霧化器,在此與穩(wěn)定的霧化氣體(一般為氮氣)混合形成氣溶膠。氣溶膠由均勻分布的液滴組成,液滴大小取決于分析中采用的氣體流量。氣體流量越低形成的液滴越大,液滴越大則散射的光越多,從而提高了分析靈敏度,但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發(fā)。每種方法均存在產生最佳信號噪音比率的優(yōu)化氣體流量。流動相流速越低要求適當霧化的氣體流量也越低。用內徑為2.1mm的微徑柱代替內徑為4.6mm標準型分析柱,能大大降低流動相流速,因而提高分析的靈敏度。
 
  步驟2:蒸發(fā)
 
  氣溶膠中揮發(fā)性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發(fā)。為特定應用設置適當的漂移管溫度,取決于流動相組成和流速,以及樣品的揮發(fā)性。高有機含量流動相比高含水量流動相要求蒸發(fā)的漂移管溫度低。流動相流速越低比流動相流速越高要求蒸發(fā)的漂移管溫度越低。半揮發(fā)性樣品要求采用較低的漂移管溫度,以獲得最佳靈敏度。最佳溫度需要通過觀察各溫度時的信號噪音比率來確定。
 
  步驟3:檢測
 
  懸浮于流動相蒸汽中的樣品顆粒從漂移管進入到光散射檢測池。在檢測池中,樣品顆粒散射激光光源發(fā)出的光而蒸發(fā)的流動相不散射。散射光被硅光電二極管檢測,產生電信號輸送模擬信號輸出端口,被用于模擬輸出的數據采集。
 

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