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上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞分離培養(yǎng)總結(jié)會(huì)

時(shí)間:2024-11-6閱讀:1057
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簡(jiǎn)介:上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。 我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,致力于動(dòng)物模型、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包、整體實(shí)驗(yàn)外包,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包、整體畢業(yè)課題等等。
 
  詳情:本周三  2024年11月6日,公司組織,由實(shí)驗(yàn)室主管劉博主導(dǎo),實(shí)驗(yàn)室全體成員參與,對(duì)人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞分離培養(yǎng)中的相關(guān)知識(shí)點(diǎn),進(jìn)行了培訓(xùn)與交流。
 

  本次會(huì)議,主要針對(duì)人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞分離培養(yǎng),就以下內(nèi)容展開了交流:

1.血液樣本的準(zhǔn)備:首先從健康供者或患者身上通過(guò)外周靜脈抽取血液樣本,并使用抗凝劑處理。

  

2.單核細(xì)胞的分離:通過(guò)密度梯度離心法,如使用Ficoll-Paque等介質(zhì),將血液樣本中的單核細(xì)胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells, PBMCs)分離出來(lái)。

  

3.細(xì)胞的培養(yǎng):將分離出的PBMCs以適當(dāng)?shù)募?xì)胞密度接種到預(yù)先涂覆有細(xì)胞粘附因子(如纖維連接蛋白)的培養(yǎng)容器中,并使用專門的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)條件通常包括適宜的溫度(37°C)、5% CO2的氣體環(huán)境和一定的濕度。

  

4.細(xì)胞的誘導(dǎo)分化:為了促進(jìn)EPCs的生長(zhǎng)和分化,通常會(huì)向培養(yǎng)基中添加多種生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子,如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)和胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)等。

  

5.細(xì)胞的鑒定:EPCs的鑒定通常基于細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá),如CD31、CD34、CD133、KDR(血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-2)和vWF(血管假性血友病因子)。流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光染色是常用的鑒定方法。

  

6.細(xì)胞的擴(kuò)增和功能驗(yàn)證:通過(guò)傳代培養(yǎng),可以擴(kuò)增獲得足夠數(shù)量的EPCs。此外,還可以通過(guò)體外毛細(xì)血管形成實(shí)驗(yàn)等功能性實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證EPCs的功能。

本次會(huì)議,提升公司對(duì)人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞分離培養(yǎng)的重要知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)知。



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