小鼠ELISA試劑盒實驗標準以及質量的平衡一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。
加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。在小鼠ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA檢測試劑盒中似不恰當。
屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐，因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA檢測試劑盒反應總是需要一定時間的溫育。
phospho-p53BP1     磷酸化p53結合蛋白1抗體
PP1A    蛋白磷酸酶2Cα抗體
Phospho-Paxillin    磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
PGP9.5    神經細胞胞漿蛋白9.5抗體
phospho-PKA beta    磷酸化蛋白激酶Aβ抗體
PKA R2    蛋白激酶A受體2α亞基抗體
phospho-PKA R2     磷酸化蛋白激酶A受體2α亞基抗體
PKA gamma    蛋白激酶Aγ抗體
PKA regulatory subunit I beta    蛋白激酶受體相關1β抗體
PRDM1    B淋巴細胞誘導成熟蛋白1抗體
phospho-PTPRA    磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗體
PRKAR1    蛋白激酶A調節亞基a1抗體
phospho-PTPRA     磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗體
PDZD    PDZ結構域PDZK蛋白抗體
PPAP2A    磷酸脂磷酸水解酶1抗體
P14ARF    抑癌基因p16/p14/P19抗體
PTPH1    蛋白酪氨酸磷酸酶H1抗體
小鼠ELISA試劑盒