的試劑，良好的儀器和準確的操縱是保證ELISA試劑盒檢測結果正確可靠的必要前提。血清標本宜在新鮮時檢測。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同即是血清。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP ，也會產生假陽性反應。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清天然凝固、收縮后即可取得。大部門ELISA檢測均以血清為標本。在ELISA中血漿和血清可平等應用。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。
血清標本可按常規方法采集，應留意避免溶血，紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP 為標記的ELISA 測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。ELISA的操縱因固相載體的形成不同而有所差異，海內醫學檢修一般均用板式點。
可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。反復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保留作多次檢測，宜少量分裝冰存。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。如在冰箱中保留過久，其中的可發生聚合，在間接法ELISA 中可使本底加深。保留血清自采集時就應留意無菌操縱，也可加入適當防腐劑。除特殊情況外，在醫學檢修中均以血清作為檢測標本。本文將敘述板式ELISA各個操縱步驟的留意要點，珠式、管式及磁性球ELISA，進口ELISA試劑盒均與特殊儀器配合應用，兩者均有具體的使用說明，嚴格遵照劃定操縱，必能得出正確的結果。