(1)標(biāo)本溶血
ELISA試劑盒因?yàn)楦鞣N人為要素致使的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞損壞溶解時(shí)釋放出很多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,會(huì)致使非特異性顯色,攪擾測(cè)定成果。為戰(zhàn)勝上述攪擾效果,標(biāo)本收集時(shí)有必要注意防止溶血。
(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中也許富含內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,因而,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同,亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測(cè)定成果。
(3)標(biāo)本保留不妥
ELISA試劑盒在冰箱中保留過(guò)久的標(biāo)本,血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)致使本底過(guò)深、乃至形成假陽(yáng)性;標(biāo)本放置時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性削弱,亦可呈現(xiàn)假陰性。為戰(zhàn)勝上述攪擾,ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮收集;如不能立即測(cè)定,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)有些濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混合后再測(cè)定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不行激烈振動(dòng)。
(4)標(biāo)本凝聚不全
在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下,正常血液收集后1/2~2h開(kāi)端凝結(jié),18~24h*凝結(jié)。臨床查驗(yàn)工作中,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)刻迅速檢查,常在血液還未開(kāi)端凝結(jié)時(shí)即強(qiáng)行離心別離血清,此刻的血清中仍殘留有些纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中能夠構(gòu)成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易形成假陽(yáng)性成果;這類(lèi)狀況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查成果變?yōu)殛幮浴榉乐股鲜鰯嚁_效果,處理的方法*是血液標(biāo)本收集后有必要使其充沛凝結(jié)后再別離血清,或標(biāo)本收集時(shí)用帶別離膠的采血管或于采血管中參加恰當(dāng)?shù)拇倌齽?br />(5)標(biāo)本管中增加物質(zhì)的影響
ELISA試劑盒抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA體系中辣根過(guò)氧化物酶活性)及迅速別離血清的別離膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有一定攪擾效果。
通過(guò)以上的剖析和總結(jié),臨床查驗(yàn)ELISA測(cè)定中呈現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性等過(guò)錯(cuò)的成果,掃除ELISA試劑盒要素和操作要素,再有就是從標(biāo)本要素進(jìn)行剖析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施掃除攪擾,然后保證檢查成果的準(zhǔn)確性。
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