腫瘤細胞冷凍保存細胞的解凍與復蘇要點:慢凍快融
(1)快速解凍。凍存細胞從液氮中取出后,應立即放入 37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在 1 分鐘內全部融化(不要超過 3 分鐘)。
(2)解凍操作過程動作要輕。由于冷凍保存過的細胞變得非常脆弱,不僅解凍速度要快,而且動作要輕。一般情況下,解凍后的細胞可直接接種到含*生長培養液的細胞培養瓶中直接進行培養(1ml 凍存細胞液加入到 25-30ml 新鮮*培養液中),24 小時后再用新鮮*培養替換舊培養液,以去除 DMSO。如果,細胞對冷凍保護劑特別敏感,那么,解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑,然后再腫瘤細胞接種到含*生長培養液的培養瓶中。
特別注意:
(1)解凍時務必注意安全,預防冷凍管爆裂。要帶手套,用鑷子將細胞冷凍管從液氮中取出,放入 37℃水浴中。切不可直接用手,以免凍傷。
(2)冷凍管在水浴中解凍時,要將凍存管蓋子擰緊,確定擰緊后再投入水浴鍋中腫瘤細胞,注意液面不可超過凍存管蓋面,否則,易發生污染。
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