酚紅在ATCC細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑，一般情況下，可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值，中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色；但低血清或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同，不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗(yàn)來判定pH值，建議使用pH計進(jìn)行測定。酚紅通常對含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基的生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生明顯影響，也可通過純化技術(shù)去除，但酚紅在無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡，影響細(xì)胞生長，這種作用能被血清所中和或減輕。因此，酚紅并不是細(xì)胞培養(yǎng)基中必需的一種成份，很多國外的疫苗或抗體企業(yè)在過程中都使用無酚紅細(xì)胞培養(yǎng)基。
碳酸氫鈉在ATCC細(xì)胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng)，此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用。通常產(chǎn)品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個標(biāo)準(zhǔn)、安全量，是在科學(xué)的基礎(chǔ)上根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)所得，但是由于不同的細(xì)胞系（株）不同，同一株細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境也可能不同（細(xì)胞耐受性不同等），且存在的地域性水質(zhì)差異等，在實(shí)際過程中也可稍作改動，但使用者需做相應(yīng)的檢測（理化及細(xì)胞試驗(yàn)等）。
HEPES是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 ～7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，其在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34 g /L）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10～25 mmol/L。
丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。
谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，4℃下放置1周可分解50%，使用中單獨(dú)配制，置-20℃冰箱中保存，使用前加入ATCC細(xì)胞培養(yǎng)液中。