ELISA試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。

ELISA試劑盒實驗的正確加樣方法：
1、仔細閱讀運用說明書。 
2、仔細校正溫度到37℃，水浴箱為佳；  
3、在運用進程校正加樣器；10ul以下加樣器選用進口產品（芬蘭、法國等）； 
4、運用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等。 
5、加樣時一定要仔細，加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。
6、加樣后，重復抽吸3次混勻，防止血清調集孔底，致使非特異性吸附。

ELISA試劑盒然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結合物，經第二次孵育后，酶結合物就會與*次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合，洗板除去未結合的酶結合物，加入TMB底物溶液。
在第三次孵育時會發生酶-底物反應，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應，并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體Elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。