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人白細胞介素35elisa試劑盒檢測中的技術支持

來源:南京信帆生物技術有限公司   2017年05月23日 23:21  

人白細胞介素35(IL-35)elisa試劑盒簡介

白細胞介素即是由多種細胞產生并作用于多種細胞的一類細胞因子。[1]

目前至少發現了38個白細胞介素[2]  ,分別命名為IL-1~IL38,功能復雜,成網絡,復雜重疊[3]  ;在免疫細胞的成熟、活化、增殖和免疫調節等一系列過程中均發揮重要作用,此外它們還參與機體的多種生理及病理反應。[1]

免疫系統細胞的增殖、分化和功能受到一系列細胞因子的調節。根據細胞因子的結構同源性可將其分為幾個蛋白質家族,如IL-1家族、IL-6家族、IL-10家族、腫瘤壞死因子家族和造血因子家族等。白細胞介素穿插歸類為其中。

IL-38

結構:白細胞介素(interleukin, IL)-38是zui近發現的IL-1家族細胞因子的第10個成員。IL-38的特異性受體為IL-36R,它是IL-36的部分受體拮抗劑。

功能:IL-38可抑制Th17細胞產生IL-17和IL-22等炎癥介質,也可抑制IL-36γ誘導產生IL-8,從而抑制炎癥反應。

人白細胞介素35(IL-35)elisa試劑盒檢測中的

間接法

  1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;

  2.次日洗滌3次;

  3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;

  4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;

  5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;

  6.zui后一遍用DDW洗滌。

    7.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

  8. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

  9. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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