三级片视频播放,精品三级片在线观看,A级性爱视频,欧美+日韩+国产+无码+小说,亲子伦XX XX熟女,秋霞最新午夜伦伦A片黑狐,韩国理伦片漂亮的保拇,一边吃奶一边做边爱完整版,欧美放荡性护士videos

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>其他文章>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

以毛細管轉移方式進行北方轉印實驗

來源:上海源葉生物科技有限公司   2010年12月30日 15:41  

  要進行北方雜合反應前,必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙(nitrocellulose membrane) 或尼龍膜 (nylon membrane) 上,這一個過程稱為轉印 (blotting)。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 (capillary transfer)、真空轉移法 (vacuum transfer) 與電轉印法 (electroblotting)。 毛細管轉移法借助吸水紙吸收轉移緩沖液時所產生的牽引力量將RNA自洋菜膠體轉移至膜上;要轉印*,起碼需要作用6 h以上。 雖然所需花費的時間比較長,以其不須要特別的儀器設備,毛細管轉移法目前仍被普遍采用。 若分析RNA時采用變性聚丙烯酰胺膠體電泳,則必須以電轉印法進行RNA轉印。至于膜的選擇,硝基纖維素膜的優點是比較不會產生非專一性反應;不過其一旦被潤濕再烘干的后,容易碎裂,不適用于進行多次雜合反應。 尼龍膜的優點是韌性好,與核酸結合的能力也相當強,正可以彌補硝基纖維素膜的缺點,現已成為主流。 一旦將RNA轉移至膜上后,即可以利用紫外線照射法 (uv irradiation) 或真空干燥法 (在真空下80℃加熱2 h) 將其固定于轉印膜上。

 
    儀器用具:塑料盒;玻璃板;裁紙刀
 
    藥品試劑:20×SSC (3 M NaCl, 300 mM sodium citrate);尼龍膜;3MM 濾紙;吸水紙;dH2O/DEPC
 
     方法步驟:
    1) 將甲醛洋菜膠體移放在塑料盒內,以dH2O/DEPC沖洗數次,以便去除甲醛。
?? 注意:在移動膠體時請特別留心,不要把膠體弄破了!
    2) 注入100 mL 20×SSC,靜置5 min。
    3) 根據圖所示,依序在塑料盒上堆棧玻璃板、濾紙 (作為鹽橋)、電泳膠、尼龍膜、三層濾紙、與吸水紙,以便以毛細管轉移方式將RNA 轉印于尼龍膜上;塑料盒內裝入適量20×SSC,以便作為轉移緩沖液。
以毛細管轉移法進行核酸轉印
??  注意:
    a. 濾紙與尼龍膜應先以20×SSC 潤濕,再用于堆棧。
    b. 在濾紙、尼龍膜、與電泳膠夾層間可能會有氣泡存在,因此在放好電泳膠、尼龍膜或濾紙后,應立即檢視,并以食指輕輕平移的方式小心趕走氣泡。
    c. 此轉印步驟將持續至隔天才結束。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 舟山市| 宁国市| 威信县| 淳化县| 辽宁省| 石泉县| 桓仁| 霸州市| 浦县| 澜沧| 海伦市| 长治县| 乾安县| 定日县| 舟山市| 杭州市| 平乐县| 墨脱县| 西城区| 宁国市| 应用必备| 夏津县| 武穴市| 孟津县| 安化县| 泰来县| 高雄市| 镇远县| 内黄县| 小金县| 和平区| 故城县| 达州市| 曲阜市| 聊城市| 辰溪县| 探索| 吴江市| 阳城县| 常山县| 韶关市|