ELISA試劑盒試驗中可用作ELISA測定的標本非常廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均對等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝集、縮短后即可取得。
除特殊情況外，在醫學查驗中均以血清作為查看標本。在ELISA中血漿和血清可對等運用。血清標本可按常規辦法搜集，應留心避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標本或許會添加非特異性顯色。

ELISA試劑盒試驗中血清標本宜在新鮮時查看
如有細菌污染，菌體中或許富含內源性HRP，也會發生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其間的可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超越一星期測定的需低溫冰存。

凍住血清融解后，蛋白質有些濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上劇烈振動。混濁或有堆積的血清標本應先離心或過濾，弄清后再查看。
重復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次查看，宜少量分裝冰存。保存血清自搜集時就應留心無菌操作，也可參加恰當防腐劑。
ELISA試劑盒試驗大多數查看均以血清為標本。