【方法】ATCC細胞用海藻酸鈉和氯化鈣固定綠色木霉,將游離綠色木霉和固定化綠色木霉分別培養一段時間,離心培養液,用分光光度計法檢測上清液中纖維素酶活性。在上清液中加入濃縮的小球藻懸浮液,用顯微鏡計數細胞壁破碎的小球藻。
【結果】綠色木霉能同時分泌內切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶及 β-1,4 葡萄糖苷酶 3 種纖維素酶,其中外切葡聚糖酶活性zui高。固定化綠色木霉反復使用 5 次后,分泌的纖維素酶活性能保持到初次的 67.4%。市售纖維素酶、游離綠色木霉、固定化綠色木霉初次及第 5 次分解小球藻細胞壁的效率分別為 47.3%、86.5%、81.5%、52.1%。
【結論】市售纖維素酶、游離綠色木霉、固定化綠色木霉都能分解小球藻細胞壁,其中固定化綠色木霉因可重復使用,具有潛在的應用前景。
小球藻(Chlorella sp.)是一種普生性單細胞綠藻,含有豐富的蛋白質、糖類及脂肪,其中不飽和脂肪酸的含量較高,且含有二十二碳六烯酸 (DHA)。另外,小球藻還具有特殊的功能成分—— 小球藻活性生長因子(CGF),CGF 具有抗衰老、活化人體細胞、激活淋巴細胞、增強巨噬細胞吞噬能力,有效抑制變異癌細胞的生長、增強機體的免疫能力,抵抗外來病毒入侵;減輕因藥物等有機物、鉛、砷、汞等重金屬造成的毒害等功能。
我國養殖的小球藻主要有:普通小球藻 (Chlorella vulgaris)、橢圓小球藻(Chlorella ellipsoidea)和蛋白核小球藻(Chlorella py-renoidosa)。不論哪種小球藻,細胞壁均非常堅硬,對其有效破壁一直是個難題。小球藻雖然營養豐富,若細胞壁不破碎,其有效成分難以獲取,應用價值因此而受到影響。目前,破碎小球藻細胞壁的方法主要為物理法,如研磨法、機械勻漿法、交替凍融法、超聲波破碎法、高壓均質法。
ATCC細胞這些方法或因破壁效率不高、或因破壁時間較長、或因破壁過程中高溫對細胞活性物質的損害等原因,在實際應用中受到了不同程度地限制。小球藻細胞壁的主要成分是纖維素,若能將纖維素分解,則細胞壁也將被破碎。分解纖維素zui有效、zui溫和的催化劑是纖維素酶。綠色木霉是自然界分泌纖維素酶zui強的真菌之一。本文研究了綠色木霉分泌物對小球藻細胞壁的酶解作用。
beta-Eudesmol beta-桉葉醇 473-15-4 20mg
Betulin 白樺脂醇; 樺木醇 473-98-3 20mg
Brazilin 巴西蘇木素; 蘇枋精 474-07-7 20mg
Daucosterol 胡蘿卜苷 474-58-8 20mg
Campesterol 菜油甾醇 474-62-4 10mg
Nuciferine 荷葉堿 475-83-2 20mg
ATCC細胞
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