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ELISA試劑盒樣本處理五部曲助您精彩實驗

來源:研域生物技術(上海)有限公司   2017年11月01日 09:44  

ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫實驗中要害的一步,稍有不小心將導致實驗滿盤皆輸,怎么安全,方便的處理樣本,樣本處理五部曲助您精彩實驗。

一, 均質
安排樣本:肉、肝食品類切細,用絞肉機重復絞碎,混合均勻。
水產樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細,用均質器均漿;質料外表較臟時,需適當用蒸餾水清洗。
蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充沛混勻。
生果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除掉外表的水分,取食用部分。

二, 振動提取
將提取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中,振動,使提取溶劑與容器內的樣品充沛觸摸以深化到樣本安排內部,提取待測組分。
1振動辦法:振動器上進行上下、往復式振動、手搖式上下振動。
2 在安排樣本中參加有機溶劑之間提取時,應邊加邊振動,防止安排凝聚成團,不利于提取。

三, 在用有機溶劑提取進程中,如果呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象,處理的辦法有:①用細頭悄悄的拌和,損壞乳化后,再重復離心。②再參加適量的提取劑,從頭振動。留意離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變。

四, 濃縮
因為凈化進程中引進的溶劑,可能會下降待測組分的濃度或許不適宜直接剖析,需要去除悉數(shù)有機溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干,小鼠elisa試劑盒再用復溶液溶解干燥殘留物。

留意:
1、在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質干擾。
2、在吹樣本時,針頭應在液面上空,防止與樣本觸摸,防止發(fā)生穿插污染。
3、樣本吹干后應立即取下,防止吹的時刻過長,影響*終檢測成果。
4、不同的藥物,吹干后樣本的保質期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復溶。
5 、凈化

通過提取的待測組分中一般含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應的雜質或許是含有與待測物結構類似的雜質。將待測組分與雜質分離的進程,我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理辦法中涉及到的*常見的凈化是:液液分配法。
比方:用復溶液溶解干燥殘留物之前先參加適量的正己烷,在參加正己烷和復溶液渦動后如果呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象,能夠60℃水浴加熱,至乳化現(xiàn)象消失或削弱后,加大離心轉速進行離心。

 

溫馨提示Elisa實驗運用留意事項:
1、小鼠ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2、濃洗刷液可能會有結晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果
3、各步加樣均應運用加樣器,并常常校正其準確性,以防止實驗誤差。一次加樣時刻控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦運用排槍加樣。
4、請每次測定的一起做規(guī)范曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔孔OD值的),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,核算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5、嚴格按說明書的操作進行,實驗成果判定有必要以酶標儀讀數(shù)為準.
6、本試劑不同批號組分不得混用。
7、封板膜只限一次性運用,以防止穿插污染。
8、所有樣品,洗刷液和各種廢棄物都應按感染物處理。
9、底物請避光保存。

 

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