過氧化物酶染色液(聯苯胺法)說明書中文版
產品簡介:
過氧化物酶(Peroxidase,簡稱POX或MPO)是由微生物或植物所產生的一類能催化很多反應的以過氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶氧化還原酶,主要存在于細胞的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。
過氧化物酶染色液(聯苯胺法)是ICSH推薦采用的POX染色液,其原理是細胞內的過氧化物酶能將無色的3,3-二氨基聯苯胺(DAB)的氫原子傳遞給過氧化氫,使前者催化成有色染料沉積在細胞質中的POX所在部位。該染液可用于血液、骨髓或細胞涂片過氧化物酶染色, POX活性部位呈棕黃色。
產品組成:
編號 名稱 | MX0081 4×10ml | MX0081 4×20ml | Storage | ||
試劑(A): BFA固定液 | 10ml | 20ml | 4℃ 避光 | ||
試劑(B): POX孵育液 | B1: DAB染色液 | 10ml | 20ml | 4℃ 避光 | |
B2: DAB氧化劑 | 2×100μl | 4×100μl | RT | ||
臨用前,按B1:B2=1000:1比例混合,即為POX孵育液,即配即用。 | |||||
試劑(C): WG染色液 | 10ml | 20ml | RT 避光 | ||
試劑(D): WG buffer | 10ml | 20ml | RT | ||
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
載玻片
顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
血液、骨髓或細胞涂片滴加預冷的BFA固定液,4℃固定30~60s,稍水洗。
2、滴加配制好的POX孵育液,室溫(20~25℃)避光孵育10~15min,水洗2min。
3、滴加WG染色液,孵育30~60s。
4、直接滴加等量WG buffer,染色10~15min。
5、水洗、晾干、鏡檢。
染色結果:
POX活性部位 | 棕黃色 |
細胞核 | 藍色 |
粒細胞系除早期原粒細胞陰性外,分化好的原粒細胞以下階段細胞隨細胞成熟而陽性反應增強,衰老中性粒細胞反應程度減弱單核細胞系弱陽性,淋巴細胞系為陰性。漿細胞及巨核細胞均為陰性。嗜酸性粒細胞和Auer小體呈強陽性反應。
陽性反應強度的判斷:
陰性 | 無顆粒 |
弱陽性 | 顆粒小,分布稀疏 |
陽性 | 顆粒略粗,分布密集 |
強陽性 | 顆粒粗大,呈藍黑色,充滿胞漿 |
臨床意義:
急性粒細胞白血病晚期的原粒細胞呈陽性,顆粒較少且大。
急性單核白血病細胞呈陰性或弱陽性,顆粒小且稀疏。
單核急性白血病呈陰性或弱陽性。
急性早幼粒白血病呈強陽性,某些早幼粒細胞呈陽性,惡性組織細胞呈陰性。
急性淋巴細胞白血病呈陰性。
注意事項:
血液或骨髓涂片應新鮮,薄厚適宜,及時固定,否則會影響酶的活性。
POX孵育液易失效或降低陽性強度,即配即用,不宜久置。
樣本在未染色前切勿接觸氧化劑類物質,以免細胞內的過氧化物酶被抑制。
每次染色時,應采取健康人末梢血或骨髓涂片作為陰性對照。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 6個月有效。
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