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免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒常見問題匯總

來源:愛必信(上海)生物科技有限公司   2018年02月24日 14:11  

Q:步驟上的可選步驟能否省略?

A:該試劑盒是經(jīng)過實驗驗證的,再進(jìn)行驗證實驗的時候?qū)嶒炇叶际且鲞@個可選步驟的,建議不要省略,按照說明書操作。

 

Q:protein A和protein G beads怎么選?

A:各5ul就可以了

 

Q:超聲破碎冰上操作是必須的嗎?4℃條件能否微調(diào)?

A:建議冰上操作,4℃是可以微調(diào)的。

 

Q:beads出現(xiàn)吸不出來的情況,怎么處理?

A:吸之前需注意槍頭要剪一下再吸,如若beads吸不上來,可加入等體積的20%乙醇混勻后再吸。

 

Q:如果沒有超聲破碎儀的話,能不能用酶解的辦法破碎細(xì)胞?

A:酶解和超聲都是可以的,酶的濃度按照正常實驗室使用濃度就可以。

 

Q:實驗的時候能抗體beads一起加嗎?還是先加抗體再加beads?

A:都可以,建議參考說明書使用,先加抗體再加beads。

 

Q:washing buffer一定要使用配套的嗎?

A:zui終濃度是稀釋的1*的washing buffer都可以。

 

Q:怎么看出現(xiàn)的條帶結(jié)果?

A:比較關(guān)注的就是三個泳道,input和IgG以及檢測互相作用的泳道,理論上input有一條目的條帶,IgG沒有條帶。如果input沒有條帶,說明在進(jìn)行免疫共沉淀之前沒有進(jìn)行WB驗證,建議先驗證之后再從頭做。IgG陰性對照出現(xiàn)條帶的話是不正常的,應(yīng)該是受重鏈和輕鏈的影響,說明使用的二抗不正確,建議更換特異性更強的二抗。

 

Q:免疫共沉淀試劑盒裂解液能用于組織嗎?比例又是如何?

A:可以的,不過要事先將組織研磨成勻漿,比例和細(xì)胞比例一致。

 

愛必信免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒:

   貨號   產(chǎn)品名稱   規(guī)格
   abs955   免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒   50tests

 

愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨):

二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子、信號通路調(diào)節(jié)劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒;動植物提取物...

 

愛必信(上海)生物科技有限公司

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