細胞凍存是細胞保存的首要辦法之一。使用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，能夠使細胞暫時脫離成長狀況而將其細胞特性保存起來，這樣在需求的時分再復蘇細胞用于試驗。并且適度地保存一定量的細胞，能夠避免因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的效果。除此之外，還能夠使用細胞凍存的方式來購買、寄贈、交流和運送某些細胞。

細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點下降，加之在緩慢凍結條件下，細胞內水分透出，減少了冰晶構成，然后避免細胞損傷。 選用"慢凍快融"的辦法能較好地保證細胞存活。規范冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min，當溫度低于-25℃時可加快，到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。
細胞冷凍辦法：
1.４℃以下慢慢地冷凍，保存于液態氮中（-196℃）。
2.有些細胞假如選用上述的辦法時，無法得到高的存活率。此刻，則必需考慮可能損傷細胞的機制，添加劑之效果等而來找出適當的條件來批改。
補白：經過冷凍保存后的細胞，其生存率會下降，冷凍時之冷卻速度，保存溫度，凍結時升高溫度的速度以及添加之冷凍保存液之品種、濃度等都可影響細胞存活率。
3.37℃快速凍結。
4.保護劑（抗凍劑）：添加甘油 （glycerol） （ I0 %左右 ） 或dimethy1sulfoxide （DMSO） （ 5- 10% ） 。