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ELISA試劑盒試驗經常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種關閉液廉價、安穩，在去除洗刷過程中的一些非特異結合上很有用。但它們只在存在時起作用，ELISA試劑盒由于很簡單被洗掉。因此一切洗刷液中也有必要增加關閉液。請勿運用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會降低特異結合，發生假陰性。另一個選擇是運用蛋白和非離子型去污劑這兩種關閉液，后者可幫忙洗刷過程中的關閉。
蛋白關閉液則有所不同，是*的。它們與開放位點結兼并關閉，一起安穩與微孔板結合的抗原分子。常用的蛋白關閉液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內涵多樣性可使它有用攔截許多不同類型的分子相互作用。不過，它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。處理這個問題的一種辦法是運用雞或魚的正常血清。
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