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二手液相色譜儀是一類分離與分析技術，其特點是以液體作為流動相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發展的過程中.為了區分各種方法，根據固定相的形式產生了各自的命名，如，紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
對二手液相色譜儀的要求
1、流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。
2、流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應該恢復到室溫后使用。
3、不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
4、使用緩沖溶液時，做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
5、長時間不用儀器，應該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應該用有機相(如，甲醇等)，因為，純水易長霉。
6、每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
7、C18柱不能進蛋白樣品，血樣、生物樣品。
8、堵塞導致壓力太大，按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗，清洗方法：
①以異丙醇作溶劑沖洗；
②放在異丙醇中間用超聲波清洗；
③用10％稀硝酸清洗；
9、氣泡會致使壓力不穩，重現性差，所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。
10、如果進液管內不進液體時，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進行流動相的清洗。
11、要注意柱子的pH值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。
12、更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗，二手液相色譜儀然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。
原因有以下三點：
（1）流動相過濾在理論上有好處，但是，實際操作時由于不可能做到專瓶，反而容易造成的交叉污染，對于配比復雜的流動相影響更大。
（2）流動相過濾在經濟成本上不劃算。買一套過濾裝置要6000多元，且過濾器*是比較容易損壞的設備。zui主要是過濾片的成本太高，一片就要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計算，過濾片的成本會遠遠高于色譜柱的成本。
（3）流動相過濾對于工作效率成本不劃算。使用溶劑過濾器有一個預清洗、裝備、使用、用后清洗，晾干的過程，至少也有一個小時的時間。這個成本也不能忽視。
（4）二手液相色譜儀在實際工作未發現流動相不過濾會對柱壽命有任何影響。我們起碼有6年時間沒有做過流動相過濾的工作，但是和國內同行相比較，在同等使用強度下我們的柱壽命是比較長的。
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