在實際操作中，凍存轉化細胞要進行復蘇，再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內，再次形成胞內結晶損傷細胞。 

一、凍存細胞復蘇的操作步驟

（1）佩戴眼鏡和手套，從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

（2）迅速放入 38℃水浴中，并不時搖動，在 1 分鐘內使其*融化，然后在無菌下取出細胞。

（3）在 1000r/min速度下離心 5～10 分鐘，棄去上層液，加入適量培養液后接種于培養瓶中，接種濃度 1×109/L，置 37℃溫箱靜置培養，次日 更換一次培養液，繼續培養，觀察生長情況。若細胞密度較高，及時傳代?；驘o需離心直接將細胞加入瓶中，并加入培養基貼壁培養 12～24 小時 后，充去上清，換入新鮮培養基繼續培養。

 二、凍存細胞復蘇的注意事項

（1）從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存，但為對數生長期細胞。在凍存前一天換一次培養液；

（2）將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，以免凍傷；

（3）轉化細胞凍存和復蘇用新配制的培養液。

人前列腺平滑肌細胞*培養基 100mL

人前列腺成纖維細胞*培養基 100mL

人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養基 100mL

人胰腺星狀細胞*培養基 100mL

人胰腺上皮細胞*培養基 100mL

人淋巴內皮細胞*培養基 100mL

人淋巴成纖維細胞*培養基 100mL

人淋巴血管內皮細胞*培養基 100mL

人臍帶單核細胞*培養基 100mL

人外周血白細胞*培養基 100mL

人食管上皮細胞*培養基 100mL

人食管平滑肌細胞*培養基 100mL
轉化細胞