細胞免疫染色復染

來源：上海源葉生物科技有限公司 2011年03月24日 18:16

復染常有助于在細胞免疫染色中鑒別不同的細胞類型，或者亞細胞結構。這對組織切片來說是基本步驟，并可鑒定細胞的類型。也可用于其他染色反應。復染不能使用熒光染料，因其復染后可產生自發熒光。為了選擇一種適宜的復染方法，首先應檢測細胞染色試劑是否在乙醇中可溶。

1．不溶于乙醇的方法

（1）用水輕輕洗滌標本片；

（2）加數滴Harris蘇木精（商品化試劑）于標本中，孵育約5min。染色時間的長短決定染色的強度；

（3）用水輕輕洗滌；

（4）用0．5％冰乙酸／99．5％乙醇處理標本片大約10rain；

（5）用水輕輕洗滌；

（6）用DPX封片。

2．溶于乙醇的方法

（1）用水輕輕洗滌標本片；

（2）加數滴Mayer蘇木精（商品化試劑）至標本片，孵育大約5min，染色時間的長短決定染色的強度；

（3）用水輕輕洗滌；

（4）用30mm01／L氫氧化銨重復處理標本片

（5）用水輕輕洗滌；

（6）用Gelvat01或MOWi。1封片。

復染	推薦用法	需準備試齊	優點	缺點
蘇木精	可用于黑色或棕色染料；用于核或細胞質抗原染色	可購買	可保存的信息量大；核大	染色很暗，不適合弱抗原信號的顯示
甲基綠	可用黑色或棕色染色，用于核抗原染色	貯存液二1％甲基綠溶于100mmol/L 酸鈉（pH5.5）；工作液為0．1％	染色淺，適用于弱抗原信號，胞質大	獲得的組織或細胞精細資料有限
堅固紅	用于藍色染色或LacZ檢測，可用于核或細胞質抗原染色	可購買		著色很淺，獲得的組織或細胞精細資料有限

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