低鐵飼料飼喂加定期少量放血建立的缺鐵性貧血大鼠模型

(1)復(fù)制方法  ①參考AOAC配方，由低鐵基礎(chǔ)飼料、微量元素混合物及維生素混合物配方組成。在此基礎(chǔ)上，將酪蛋白改為雞蛋清蛋白(每100g新鮮雞蛋清含蛋白質(zhì)1g計算)，纖維素改為微晶纖維素。低鐵飼料配方中除玉米淀粉、玉米油、魚肝油、維生素B12外，其余均為分析純。此低鐵飼料配方中經(jīng)測定，其含鐵量每千克飼料約含元素鐵4.8mg。②體重約為65g，經(jīng)測定其Hb含量≥130g/L的4周齡斷乳SD大鼠。隨機(jī)分為對照組(C組)和缺鐵性貧血組(IDA組)，兩組大鼠均喂低鐵飼料，自由進(jìn)食，飲去離子水。對照組于造模開始即給予右旋糖酐鐵5mg腹腔注射，以后則以此劑量每周腹腔注射1次。每周記錄1次體重，并經(jīng)尾靜脈采血測Hb。從第3周起，IDA組除飼喂低鐵飼料外，尚輔以尾靜脈放血，2次/周，放血量為每只每次約1～1.5ml(視體重及前1周Hb含量而定，多不超過總血量的10％)。經(jīng)過約8周放血，IDA組大鼠Hb測定值均≤60g/L。此時停止放血，觀察2周，Hb值仍呈繼續(xù)下降趨勢，于第10周頸椎脫臼處死動物，測定血清總蛋白、白蛋白、 Hb含量，并作血清鐵及總鐵結(jié)合力測定等指標(biāo)測定。

(2)模型特點(diǎn)  肉眼觀察當(dāng)大鼠Hb≤100g/L時，模型大鼠耳朵、腳爪均出現(xiàn)明顯蒼白，隨貧血程度加重，大鼠被捉住掙扎時其唇、舌發(fā)紺現(xiàn)象消失。造模早期(約在缺鐵飼料喂養(yǎng)的第3周，Hb值為100g/L左右時)，模型大鼠表現(xiàn)為興奮，煩躁不安，喜打架，易咬人等攻擊行為；同等條件下，對照組大鼠則表現(xiàn)為安靜，溫順；隨貧血程度加重，尤其當(dāng)Hb≤60g/L后，模型大鼠則表現(xiàn)為倦怠，活動減少，怕冷，喜蜷縮成團(tuán)。造模過程中，模型大鼠抵抗力下降，易感染，體重增長趨緩。模型大鼠Hb測定值呈持續(xù)性下降，至第10周時 IDA組動物Hb值可降至43g/L。紅細(xì)胞、HCT、MCV、 MCH、MCHC計數(shù)IDR組均較對照組顯著降低。外周血片紅細(xì)胞形態(tài)光鏡下觀察：對照大鼠紅細(xì)胞大小較為一致，血紅蛋白豐滿，紅細(xì)胞中央淡染區(qū)無擴(kuò)大，而模型大鼠紅細(xì)胞大小不等，以小細(xì)胞為主，血紅蛋白減少，紅細(xì)胞中央淡染區(qū)明顯擴(kuò)大，呈小細(xì)胞低色素改變。模型大鼠血清鐵、總鐵結(jié)合力明顯降低，運(yùn)鐵蛋白飽和度及紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉(FEP)/血紅蛋白(Hb)則明顯增高。

(3)比較醫(yī)學(xué)  迄今為止，缺鐵性貧血動物模型的制備主要采用單純?nèi)辫F飲食、缺鐵飲食輔以定期少量放血或單純放血等方法，后者現(xiàn)已很少應(yīng)用。目前，有關(guān)大鼠缺鐵時間及程度，國內(nèi)外研究結(jié)果報道不一，Hb值32～86g/L、缺鐵時間自3～4周到14周均有報道。本模型采用低鐵飼料輔以定期少量放血的方法，在3～10周內(nèi)成功復(fù)制出大鼠缺鐵性貧血模型，模型動物營養(yǎng)指標(biāo)及缺鐵性貧血指標(biāo)均與以往研究報道相符，有實(shí)用價值。