在ELISA試劑盒的使用過程中常見問題有很多如, 加樣器不確;尤其10ul以下的加樣器,對結果影響極大; 保溫設備不良; 洗滌用水不規范。
如何解決這些問題呢:
1在使用過程校正加樣器;10ul以下加樣器采用進口產品(芬蘭、法國等);
2 仔細校正溫度到37℃,水浴箱為佳;
3 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等;
4 認真閱讀使用說明書。
樣品加樣:
1 加樣不準確; 2 沒有混勻。 加樣時一定要仔細。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。
2 加樣后,反復抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導致非特異性吸附。 洗滌 洗滌不* ①每次注水洗滌,應靜止30秒鐘;②選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內水分;
3 可選用塑料洗滌瓶。 加酶反應 漏加 滴加后,認真檢查各孔 結果判斷 ①包括陰性對照孔在內,各孔顯色普遍偏深;②包括陽性對照在內,各孔均無顯色;③陽性對照不顯色,而其它樣本顯色正常;
4 有些標本顯色不深,判斷陽性困難。 ①可能是洗滌不充分;加樣過量;溫育時間過長溫度過高;按說明書重新操作。如無改善, 可與生產廠家聯系;②可能是漏加樣本或酶液;溫育時間過短溫度過低;試劑保存不當活性下降;按說明書重新 操作。如無改善,可與生產廠家聯系;③陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善,可與廠家聯系,索要對照品; ④重新操作。使用酶標儀,測定光吸收度,按P/N值標準判斷。 ELISA試劑盒保存 保存不規范 一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。 對照品 對照品為凍干品 按對照管標示,加入相應體積的去離子水或蒸餾水復溶,充分溶解混勻。可按說明書使用。
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