各位大蝦，我做了大鼠組織的TNF-α免疫組化，是取材后送到醫院病理科出錢代做的，現HE和免疫組化片子已經做好，我才意識到沒有陽性和陰性對照，請問這兩種對照該怎么弄，是我自己想辦法還是該病理科負責給我設立？需要我自己再買相應的試劑嗎？以前沒有做過，所以一頭霧水，請不吝賜教，多謝!

免疫組化染色中的對照片的設置非常重要，它是判斷您的染色是否成功的關鍵依據，而且也是檢測每一個抗體的質量標準，常設的對照如下：自身對照、陰性對照（空白對照、替代對照、抑制對照、 吸收實驗對照）、陽性對照。
A、自身對照：在同一切片上與檢測的目的物對照比較。如Actin、CD34在正常組織中的血管壁肌層應為陽性，Vimentin可以間質細胞，Desmin以血管壁及肌束為對照，S-100以小神經末為對照等，如果應為陽性的組織是陽性，則技術操作正確，如為陰性，則表明技術或免疫試劑質量有問題。
B、空白對照：用緩沖液替代一抗。
C、替代對照：用非免疫血清替代一抗。
D、抑制對照：使用與一抗相同的非標記抗體稀釋特異性一抗，適于直接法。
E、吸收實驗對照：已知抗原與相應的抗體混合，發生結合沉淀，再用此沉淀抗體復合物進行免疫組化實驗，結果為陰性。
F、陽性對照：用以含有靶抗原的切片進行對照。

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