內毒素ELISA試劑盒 注意哪些事項呢?

●分子實驗中常用生化試劑原理匯總● 1．溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌體細胞壁的主要化學成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵，因而具有溶菌的作用。當溶液中pH小于8時，溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖：增加溶液的粘度，維持滲透壓，防止DNA受機械剪切力作用而降解。 EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金屬離子，抑制脫氧核糖核酸酶對DNA的降解作用（DNase作用時需要一定的金屬離子作輔基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因為溶菌酶的反應要求有較低的離子強度的環境。 2．NaOH－SDS液： NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是穩定的。但當pH＞12或pH＜3時，就會引起雙鏈之間氫鍵的解離而變性。在溶液II中的NaOH濃度為0.2mo1／L，加抽提液時，該系統的pH就高達12.6，因而促使染色體DNA與質粒DNA的變性。 SDS：SDS是離子型表面活性劑。它主要功能有：（1）溶解細胞膜上的脂質與蛋白，因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜。（2）解聚細胞中的核蛋白。（3）SDS能與蛋白質結合成為R-O-SO3-…R＋-蛋白質的復合物，使蛋白質變性而沉淀下來。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取過程中，必須把它去除干凈，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA時）受到干擾。 3. 3mol／L NaAc（pH4.8）溶液： NaAc的水溶液呈堿性，為了調節pH至4.8，必須加入大量的冰醋酸。所以該溶液實際上是NaAc-HAc的緩沖液。用pH4.8的NaAc溶液是為了把pH12.6的抽提液，調回pH至中性，使變性的質粒DNA能夠復性，并能穩定存在。而高鹽的3mol／L NaAc有利于變性的大分子染色體DNA、RNA以及SDS-蛋白復合物凝聚而沉淀之。前者是因為中和核酸上的電荷，減少相斥力而互相聚合，后者是因為鈉鹽與SDS－蛋白復合物作用后，能形成較小的鈉鹽形式復合物，使沉淀更*。 4．為什么用無水乙醇沉淀DNA？用無水乙醇沉淀DNA，這是實驗中常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般實驗中，是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混合，其乙醇的終含量占67％左右。因而也可改用95％乙醇來替代無水乙醇（因為無水乙醇的價格遠遠比95％乙醇昂貴）。但是加95％的乙醇使總體積增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA損失也增大，尤其用多次乙醇沉淀時，就會影響收得率。折中的做法是初次沉淀DNA時可用95％乙醇代替無水乙酵，后的沉淀步驟要使用無水乙醇。也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA。一般在室溫下放置15－30分鐘即可。

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內毒素ELISA試劑盒

檢測范圍：歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產品規格：96T/48T。
主要成分：酶標板,試劑,標準品等
經營種類：進口分裝和原裝、國產
性狀：盒裝液體
試劑盒保存：2-8℃低溫保存。
標本：血清、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
預期應用：ELISA法定量測定血清、、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。

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選購要點：一、經濟性對于選擇進口品牌的試劑盒還是國產品牌的試劑盒，可以根據實驗室課題經費以及各品牌的產品質量和美譽度來自行選擇。一般質量可靠，文獻引用多。建議大家通過閱讀SCI文獻，了解同行所使用的品牌。但品牌由于進口和運輸等成本較高，因此售價也較高。 二、美譽度不論選擇品牌還是國產品牌時，都要注意產品的質量、度和美譽度。不是說所有的國外品牌質量都可靠，有些品牌其實是OEM貼牌的，質量不一定有保障。還有一些公司提供的試劑盒，就更不靠譜了，相關指標的抗體，找遍都沒有，如何開發出相應的ELISA試劑盒呢？ 所以對于新手而言，一定要謹慎選擇。 三、靈敏度和檢測范圍靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質的zui低限，用戶可根據自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒，如果待檢指標水平很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可選擇高敏的ELISA試劑盒。如果待檢指標的濃度高于試劑盒標準曲線的zui高值，則需要適當倍數稀釋樣本，計算結果時，乘以相應的系數倍數即可，如果樣本中待檢指標含量較低，一般不建議再做稀釋。 四、重復性科學實驗講求重復性，一般ELISA試劑盒，其板內和板間變異系數應該控制在15%以內。在選擇試劑盒時，要通過閱讀相應的說明書或電話咨詢廠家試劑盒的相關技術參數。 五、試劑盒特異性 ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分--抗體對有關，若抗體對中之一為多抗，另一個必須為單抗，建議使用雙單抗。在選擇市面上的試劑盒時，先閱讀相關產品的說明書，了解試劑盒的特異性和交叉反應性。 六、文獻引用選ELISA試劑盒時，SCI文獻的引用有參考價值。這也是業界對產品認可的一個非常重要的指標。重尤其選擇國內品牌時，一定要多了解下該品牌的文獻引用情況以及在業內的口碑。大家可以在Google scholar 里檢驗下。也可以到一些行業論壇上去了解相關品牌的信息，如丁香通、小木蟲等。

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編輯：小檀20181019