金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基尋找一種既能適合細胞生長又避免添加血清的培養(yǎng)基迫在眉睫,無血清培養(yǎng)應運而生。

目的:探索一種適用于C3A細胞生長的無血清培養(yǎng)基,為肝細胞用于臨床治療以及生物人工肝走入臨床奠定基礎(chǔ)。

方法:分別用無血清培養(yǎng)基、*培養(yǎng)基和基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)C3A細胞,觀察細胞的生長狀態(tài),繪制細胞生長曲線和活力曲線,全自動生化分析儀測定上清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶漏出量、尿素含量,放射免疫分析法檢測白蛋白分泌量,實時熒光定量PCR檢測基因水平的變化情況。

結(jié)果與結(jié)論:3種培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞生長良好,無血清培養(yǎng)基組與*培養(yǎng)基組細胞密度在培養(yǎng)周期內(nèi),除第7天以外差異無顯著性意義(P0.05)。培養(yǎng)第4~7天,其他兩組明顯高于基礎(chǔ)培養(yǎng)基組(P0.05);無血清培養(yǎng)基尿素合成水平*培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基(P0.05)。Real-time qPCR顯示,無血清培養(yǎng)基組相對于*培養(yǎng)基組僅CK18、CK19和HNF4α基因表達量下降(P0.05)。

說明實驗研制了一種適合于肝細胞(C3A)生長的無血清培養(yǎng)基,與傳統(tǒng)血清培養(yǎng)能達到同樣的效果。