上周五,客戶張老師聯系我司業務員,跟我司業務員反應elisa試劑盒相關問題,張老師在提到實驗中發現幾個問題,希望我司技術能給出參考意見。
客戶張老師對于elisa試劑盒在實驗中所遇到的問題,關于張老師所提出的elisa試劑盒常見問題,我司陳技術根據長期Elisa經驗這樣作出解答的:
張老師:
1、我看見有的夾心ELISA試劑盒中技術抗體和捕獲抗體為一種抗體,而不是分別針對待測抗原的不同表位的一對抗體。
我不理解的地方是:捕獲抗體把抗原上的表位都結合完了,技術抗體怎么能與抗原結合呢?
問題1:正常情況下,雙抗體夾心法中使用的包被抗體和酶標記抗體肯定不是同一個抗體,如果是同一個的話,會有很強的競爭,應該是無法做的。你是怎么知道別人試劑盒中使用的是同一個抗體的呢,這應該是無法了解的呀。
2、在網上可以搜索到有關夾心ELISA技術TNF、CEA、IL-2、IL-8等說明書,我發現它們所用的稀釋液配方都不一樣,差別很大。
TNF-a的稀釋液:PBS 100ml;BSA(牛血清白蛋白) 0.1g。
IL-6的稀釋液:洗滌液 100ml BSA(牛血清白蛋白) 0.1g。
IL-8的稀釋液:洗滌液 100 ml;
PEG(聚乙二醇,MW6000) 3.0g。
我想知道是根據什么原則來選擇稀釋液的組成?有沒有可以通用的啊?謝謝!
問題2:稀釋液基本上是和所使用的原料有關,不同的原料組成的技術相同物質的試劑盒所使用的稀釋液就可能不同。
從你提供的數據看,IL-6的稀釋液應該只比TNF-a多了個Tween-20而已,差別不是很大。至于選BSA還是PEG那就和原料有很大關系了。
Elisa試劑盒中有任何無法操作及解析的問題均可聯系我司,我們為您提供專業的售前,售后意見。
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