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人ELISA試劑盒雙抗夾心法的檢測原理

來源:上海撫生實業(yè)有限公司   2019年03月29日 09:23  

人ELISA試劑盒雙抗夾心法的檢測原理

雙抗體夾心法是檢測抗原*常用的方法,操作步驟如下:

1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

2) 加受檢標本,保溫反應(yīng)。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復合物。 洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。

3) 加酶標抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合 的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關(guān)。

4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標本中抗原的量。 在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如hbsag、hbeag、afp、hcg等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具

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