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ELISA實驗加樣防錯小竅門

來源:上海恒遠生物科技有限公司   2019年04月02日 10:23  

    上海恒遠是一家生產和銷售科學研發用試劑產品公司,領域涵蓋化學、分析化學、生命科學和材料科學等基礎創新領域,助力客戶的研究計劃,在廣大科研用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,以過硬的產品質量和好的服務態度,為客戶提供一個穩定平臺,成為客戶可信賴的長期合作伙伴。

    ELISA加樣時的防錯小竅門

    (1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報紙,墊在下面,這樣,加過標本的小孔看過去下面的字會變小,沒加的字正常,非常容易區分。

    (2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區別。

    (3)在標本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產生小氣泡,也可以加以區分。

    實驗常見問題解析

    問:做間接Elisa法測試小鼠血清中的IgE抗體,設空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數為5千、1萬、10萬、20萬不等,用的是生物素標記的羊抗鼠IgE抗體,和親和素的辣根過氧化物酶。可是結果除了空白對照孔沒有顏色外,其余各孔全有顏色,而且OD值都相差不大,為什么?

    答:可能原因如下: 
    (1) 水質被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
    (2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應注滿微孔,充分洗滌。
    (3) 移液頭重復使用,未洗凈或消毒不*; 防止辦法移液頭一次性使用。
    (4) 酶標板靈敏度過高。
    (5) 一抗顯色時間的控制等等,關于ELISA的每一步都要注意才行。

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