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細胞培養常見問題解答(FAQ)

來源:紅榮微再(上海)生物工程技術有限公司   2019年04月17日 11:54  

細胞培養相關問題:

1 冷凍管應如何解凍?

 

取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂。

 

2 細胞冷凍管解凍培養時,是否應馬上去除DMSO?

 

除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中,待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。

 

3 可否使用與原先培養條件不同之培養基?

 

不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基,若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活。

 

4 可否使用與原先培養條件不同之血清種類?

 

不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

 

5 何謂FBS,FCS,CS,HS?

 

FBS(fetal bovine serum)和FCS (fetal calf serum)是相同的意思,兩者都是指胎牛血清,FCS 乃錯誤的使用字眼,請不要再使用。CS(calf serum)則是指小牛血清。HS(horseserum)則是指馬血清。

 

6 培養細胞時應使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?

 

一般培養基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH 的緩沖系統,而培養基中NaHCO3 的含量將決定細胞培養時應使用的CO2 濃度。當培養基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g時,細胞培養時應使用10 % CO2;當培養基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應使用5 %CO2培養細胞。

 

7 何時須更換培養基?

 

視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數據上之更換時間,按時更換培養基即可。

 

8 培養基中是否須添加抗生素?

 

除于特殊篩選系統中外,一般正常培養狀態下,培養基中不應添加任何抗生素。

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