毛細管電泳系統的基本結構包括 進樣系統、兩個緩沖液槽、高壓電源、檢測器、控制系統和數據處理系統。
毛細管電泳儀的主要部件和其性能要求如下。
(1)毛細管用彈性石英毛細管,內徑50μm和75μm兩種使用較多(毛細管電色譜有時用內徑再大些的毛細管)。細內徑分離效果好,且焦耳熱小,允許施加較高電壓,但若采用柱上檢測因光程較短檢測限比較粗內徑管要差。毛細管長度稱為總長度,根據分離度的要求,可選用20~100cm長度,進樣端至檢測器間的長度稱為有效長度。毛細管常盤放在管架上控制在一定溫度下操作,以控制焦耳熱,操作緩沖液的黏度和電導度,對測定的重復性很重要。
(2)直流高壓電源采用0~30kV(或相近)可調節直流電源,可供應約300μA電流,具有穩壓和穩流兩種方式可供選擇。
(3)電極和電極槽兩個電極槽里放入操作緩沖液,分別插入毛細管的進口端與出口端以及鉑電極,鉑電極接至直流高壓電源,正負極可切換。多種型號的儀器將樣品瓶同時用做電極槽。
(4)沖洗進樣系統每次進樣之前毛細管要用不同溶液沖洗,選用自動沖洗進樣儀器較為方便。進樣方法有壓力(加壓)進樣、負壓(減壓)進樣、虹吸進樣和電動(電遷移)進樣等。進樣時通過控制壓力或電壓及時間來控制進樣量。
(5)檢測系統紫外-可見光分光檢測、激光誘導熒光檢測、電化學檢測和質譜檢測均可用作毛細管電泳的檢測器。其中以紫外-可見光分光光度檢測器應用廣,包括單波長、程序波長和二極管陣列檢測器。將毛細管接近出口端的外層聚合物剝去約2mm一段,使石英管壁裸露,毛細管兩側各放置一個石英聚光球,使光源聚焦在毛細管上,透過毛細管到達光電池。對無光吸收(或熒光)的溶質的檢測,還可采用間接測定法,即在操作緩沖液中加入對光有吸收(或熒光)的添加劑,在溶質到達檢測窗口時出現反方向的峰值。
(6)數據處理系統與一般色譜數據處理系統基本相同。
毛細管電泳儀的主要部件和其性能要求如下。
(1)毛細管用彈性石英毛細管,內徑50μm和75μm兩種使用較多(毛細管電色譜有時用內徑再大些的毛細管)。細內徑分離效果好,且焦耳熱小,允許施加較高電壓,但若采用柱上檢測因光程較短檢測限比較粗內徑管要差。毛細管長度稱為總長度,根據分離度的要求,可選用20~100cm長度,進樣端至檢測器間的長度稱為有效長度。毛細管常盤放在管架上控制在一定溫度下操作,以控制焦耳熱,操作緩沖液的黏度和電導度,對測定的重復性很重要。
(2)直流高壓電源采用0~30kV(或相近)可調節直流電源,可供應約300μA電流,具有穩壓和穩流兩種方式可供選擇。
(3)電極和電極槽兩個電極槽里放入操作緩沖液,分別插入毛細管的進口端與出口端以及鉑電極,鉑電極接至直流高壓電源,正負極可切換。多種型號的儀器將樣品瓶同時用做電極槽。
(4)沖洗進樣系統每次進樣之前毛細管要用不同溶液沖洗,選用自動沖洗進樣儀器較為方便。進樣方法有壓力(加壓)進樣、負壓(減壓)進樣、虹吸進樣和電動(電遷移)進樣等。進樣時通過控制壓力或電壓及時間來控制進樣量。
(5)檢測系統紫外-可見光分光檢測、激光誘導熒光檢測、電化學檢測和質譜檢測均可用作毛細管電泳的檢測器。其中以紫外-可見光分光光度檢測器應用廣,包括單波長、程序波長和二極管陣列檢測器。將毛細管接近出口端的外層聚合物剝去約2mm一段,使石英管壁裸露,毛細管兩側各放置一個石英聚光球,使光源聚焦在毛細管上,透過毛細管到達光電池。對無光吸收(或熒光)的溶質的檢測,還可采用間接測定法,即在操作緩沖液中加入對光有吸收(或熒光)的添加劑,在溶質到達檢測窗口時出現反方向的峰值。
(6)數據處理系統與一般色譜數據處理系統基本相同。
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