細(xì)胞凍存液配置

細(xì)胞凍存前應(yīng)該做哪些準(zhǔn)備呢？

1.準(zhǔn)備適量?jī)龃婀埽龊脴?biāo)記后置于4℃冰箱預(yù)冷；

2.配制凍存液：

        一般為80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO， 需要現(xiàn)配現(xiàn)用

3.程序降溫
a.按照細(xì)胞傳代步驟1-7操作制備細(xì)胞懸液并離心；

b.棄去上清，加入適當(dāng)體積的凍存液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液；

c.將1 ml細(xì)胞懸液加入加入之前已做好標(biāo)記的凍存管中并做好記錄；

d.將凍存管放入梯度凍存盒然后保存至-80℃過(guò)夜（可以先在4℃冰箱放置30 min，然后轉(zhuǎn)移至-20℃放置1-2 h，后轉(zhuǎn)移至-80℃過(guò)夜），第二天取出放入液氮罐，并記錄好位置信息。

是不是很繁瑣？我們來(lái)看一下HAKATA無(wú)血清細(xì)胞凍存液：

直接從4°C冰箱中取出使用，凍存管放于-80°C過(guò)夜，再轉(zhuǎn)移至液氮中。

就是這么簡(jiǎn)單直接，那么它的效果怎么樣呢？

我們來(lái)看一組對(duì)比

普通凍存液與HAKATA無(wú)血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞復(fù)蘇情況

可見(jiàn)，使用HAKATA無(wú)血清細(xì)胞凍存液的細(xì)胞復(fù)蘇（存活率和活力）更好

HAKATA無(wú)血清細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），凍存細(xì)胞可在-80°C長(zhǎng)期保存（>5年）。Cell Freezing Medium配方明確，不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白，不含血清，可減少各類(lèi)細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分，提高細(xì)胞存活率和活力，亦適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。