ELISA試劑盒使用技術(shù)及其方法

無論做什么都是熟能生巧，ELISA實驗自然也是如此，其中的操作

技術(shù)是需要充分的文字了解與反復(fù)實踐的。試劑盒使用的技術(shù)影響

有多重要?質(zhì)量可靠的試劑，良好狀態(tài)的儀器，排除各種影響因素的

干擾和正確操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。

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ELISA試劑盒使用技術(shù)及其方法如下：

1. 加樣后及時放人孵箱，標(biāo)本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。

2. 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

3. 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。

4. 合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

其次雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下：

1、將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

2、加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。

3、加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。

4、加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測知標(biāo)本中抗原的量。

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