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薄層色譜TLC通常指以吸附劑為固定相的一種液相色譜法。即將固定相在玻璃、金屬或塑料等光潔的表面上均勻地鋪成薄層，試樣點在薄層的一端，流動相借毛細作用流經固定相,使被分離的物質展開。
薄層色譜TLC的常規使用步驟如下：
1.將薄層色譜TLC板切成方形。良好的尺寸是7厘米x 7厘米，但請確保它首先適合您的溶劑容器。
2.將用于色譜柱的溶劑倒入玻璃容器中。溶劑應該是2-3毫米深，這樣斑點不會浸沒，確保了樣品不會溶解到溶劑中并隨著溶劑向上移動到TLC板上。
3.使用毛細管將樣品“點”到左下角的板上。該點應距離底部和左側邊緣約0.5-1厘米，直徑1-2毫米。
4.將薄層色譜TLC板放在容器中。不要移動或打擾板或TLC容器，因為這會導致溶劑中的波紋和溶劑的不規則。當溶劑前端距離板頂部0.5-1 cm時，用鑷子小心地從容器中取出板。
5.讓溶劑蒸發。將板旋轉90°，使原始樣品點位于右下角。組分斑點將沿著板的底部形成水平線。
6.將TLC板放回容器中。當溶劑前端距離板頂部0.5-1 cm時，用鑷子小心地從容器中取出板。
7.讓板上的溶劑蒸發，然后使用UV燈或高錳酸鉀浸漬使板可視化。
8.用鉛筆標記所有斑點的位置。從樣品被點樣的角落，通過樣品點，到對面的角落畫一條對角線。在二氧化硅上穩定的化合物將出現在對角線上。如果化合物在二氧化硅上分解，其斑點將低于對角線。
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