仁捷生物:人IL1β、 IL8、 TNF-α ELISA試劑盒文獻期刊
內(nèi) 科 2018 年12 月 第13 卷 第6 期
早產(chǎn)兒血清、腦脊液炎癥因子水平與腦損傷的關(guān)系分析
【摘要】 目的 探討早產(chǎn)兒血清、腦脊液炎癥因子水平與腦損傷的關(guān)系。方法 選取腦損傷早產(chǎn)兒46 例作為腦損傷 組,選取同期出生未合并腦損傷的早產(chǎn)兒46 例作為對照組。采集兩組早產(chǎn)兒出生后第1 天、第 3 天、第 7 天的血液及腦脊 液,檢測比較兩組早產(chǎn)兒血液及腦脊液的白介素1β( IL1β) 、白介素8( IL8) 、腫瘤壞死因子-α( TNF-α) 水平。將腦損傷組 早產(chǎn)兒按病情的嚴重程度分為輕、中、重度組,比較分析三組早產(chǎn)兒血液及腦脊液的 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平。結(jié)果 腦損 傷組早產(chǎn)兒血清、腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平均顯著高于對照組( P < 0. 05) ; 隨著出生時間( 病程) 的延長,腦損傷組早 產(chǎn)兒血清、腦脊液以上各炎癥因子水平升逐漸高,腦損傷對血清 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平的影響存在差異( P <0. 05) 。不同 病情嚴重程度的三組腦損傷早產(chǎn)兒血清及腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義( P <0. 05) ,各炎癥因子 水平均隨出生時間的延長而升高,病情嚴重程度對炎癥因子水平的影響與時間具有交互作用( P <0. 05) 。結(jié)論 早產(chǎn)兒血 清、腦脊液 IL1β、 IL8、 TNF-α 水平與其腦損傷的嚴重程度及病程有關(guān)。
實驗原理:
將目標抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
技術(shù)小提示:
1. 當混合或重溶蛋白溶液時,盡量避免起沫。
2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。
3. 每次孵育時,請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準確性。
4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,請避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍色。
5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,孔內(nèi)顏色由藍變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻;請充分混合。
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